詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
ML324 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
ML324是JMJD2去甲基酶抑制劑,被證實有抗病毒作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1222800-79-4 純度:98.19% 分子量:349.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
青霉Alexa Fluor 488標記的小鼠抗人IgGAnti-ST5 Antibody干擾α7(IFNα7)
香菇*Alexa Fluor 555標記的小鼠抗人IgGAnti-STAM Antibody干擾α6(IFNα6)
雷夫松氏菌PE-Cy3標記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody干擾α5(IFNα5)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種PE-CY5標記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody干擾α4(IFNα4)
釀酒酵母APC標記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody干擾α21(IFNα21)
枯草芽孢桿菌Cy3標記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody干擾α2(IFNα2)
遠青鏈霉菌Cy5標記的小鼠抗人IgGAnti-STAT1 Antibody(PB0539)干擾α17(IFNα17)
卷枝毛霉卷枝變型Cy5.5標記的小鼠抗人IgGAnti-STAT2 Antibody干擾α16(IFNα16)
日本根霉Cy7標記的小鼠抗人IgGAnti-STAT2 Antibody干擾α14(IFNα14)
弗氏檸檬桿菌羅丹明標記的小鼠抗人IgMAnti-STAT3 Antibody干擾α13(IFNα13)
石耳*生物標記的小鼠抗人IgMAnti-STAT4 Antibody干擾α10(IFNα10)
疣孢漆斑菌辣根過氧化物標記的小鼠抗人IgMAnti-STAT3 Antibody干擾α/β受體2(IFNα/βR2)
長毛木霉FITC標記的小鼠抗人IgMAnti-STAT2 Antibody干擾α/β受體(IFNα/βR1)
粉紅單端孢霉Cy3標記的小鼠抗人IgMAnti-STAT5 Antibody干擾α(IFNα)
新平7317(平菇類)Cy5標記的小鼠抗人IgMAnti-STAT5A Antibody肝脂(LIPC)
大腸埃希氏菌Cy5.5標記的小鼠抗人IgMAnti-STAT5A Antibody肝臟磷果糖激(PFKL)
神經內分泌肽QRFP抗體細長賴芽胞桿菌人胰腺細胞MatchPair: 胰腺上皮細胞和腫瘤原代細胞提取物
RNA結合蛋白QK1抗體無色桿菌屬胃壁細胞和腫瘤原代細胞提取物
喹啉磷核糖基轉移抗體安達桿菌屬腎上皮細胞和腫瘤原代細胞提取物
嗜性粒細胞顆粒關鍵堿性蛋白抗體副溶血弧菌乳腺上皮細胞和腫瘤原代細胞提取物
JMJD2去甲基酶抑制劑(ML324)鏈霉 澤瀉 K 23-醋酸酯
草木樨中華根瘤 11-去氧澤瀉B
蠟樣芽孢桿 1,3,5-三羥基咕噸酮
掘氏疫霉* 1,3,7-三羥基-9H-氧雜蒽-9-酮
黃曲霉 藍V
果生鏈核盤 13-羥基氧化小檗堿
泡盛曲霉 魯米諾單鈉鹽
櫟生青霉 3-O-阿魏酰奎尼酸
長柄鏈格孢 二甲苯藍FF
阿維鏈霉 4-O-阿魏酰奎尼酸
鼠傷寒沙門氏 苦參C
黑木耳 苦參X
硬結節桿 7,3'-二羥基-5'-甲氧基異黃酮
金龜子綠僵 苦參E
毛頭鬼傘 cis-宮部苔草酚C