詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GDC-0084 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
GDC-0084是一種能透過血腦屏障的PI3K和mTOR抑制劑,抑制PI3Kα,PI3Kβ,PI3Kδ,PI3Kγ和mTOR,Ki值分別為2nM,46nM,3nM,10nM和70nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1382979-44-3 別名:RG7666 純度:99.54% 分子量:382.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
猴頭菇血管緊張轉換(抗原)Anti-CXCL8 Antibody人巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)
班戈錯湖嗜鹽堿紅菌整合alpha E2抗原Anti-CYB5R1 Antibody人巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)
新疆鹽地桿菌巨噬表面分子抗原Anti-CYC1 Antibody人巨噬集落激因子(M-CSF)
楊奇青霉v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原Anti-CYB5A Antibody人巨噬集落激因子(M-CSF)
長雙歧桿菌嬰兒亞種黑色瘤相關Anti-Cyclin C Antibody人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)
鏈格孢絲裂原活化蛋白激激1抗原Anti-CYFIP2 Antibody人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)
金黃色葡萄球菌RN4220凋亡信號調節激1/絲裂原活化蛋白激激激5抗原Anti-CYP20A1 Antibody人單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)
芽孢桿菌屬抑癌基因抗原Anti-Cyclin C Antibody人單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)
鹽生鹽古桿菌蛋白裂解(一種新的癌基因)抗原Anti-CYP21 Antibody人單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)
紅細菌人巨病UL49抗原Anti-CYP26A1 Antibody人單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)
芥鏈格孢黑皮質-1受體抗原Anti-CYP27A1 Antibody人L選擇(L-Selectin/CD62L)
Bacillus anthracis髓樣白血病-1抗原Anti-CYP26C1 Antibody人L選擇(L-Selectin/CD62L)
小弧菌多藥耐藥蛋白抗原Anti-CYP2A6V2 Antibody人白介9(IL-9)
皺紋單胞菌肌增強因子2抗原Anti-CYP2A13 Antibody人白介9(IL-9)
側耳線粒體融合蛋白1Anti-CYP2A6V2 Antibody人白介8(IL-8/CXCL8)
疣孢漆斑菌金屬硫蛋白抗原Anti-CYP2A7 Antibody人白介8(IL-8/CXCL8)
多腺苷二磷多聚3抗體/多聚ADP-核糖聚合3淡天藍色鏈霉菌大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)
多腺苷二磷多聚4抗體/多聚ADP-核糖聚合4抗生鏈霉菌人肝內膽管上皮細胞
肽聚糖識別蛋白1抗體大麗花輪枝孢人顱骨成骨細胞
前細胞脹亡受體誘導膜損傷蛋白抗體出芽短梗霉小鼠神經干細胞
PI3K和mTOR抑制劑(GDC-0084)野油菜黃單孢 Isodeoxyelephantopin
熒光假單胞 胡蔓藤堿甲
釀酒酵母 Humantenidine
綠孢環柄菇 Hirsutanonol 5-O-glucoside
星狀諾氏 Hautriwaic acid
白靈側耳 Goniodiol 8-acetate
大腸埃希 鉤吻綠堿
Pilidium sp. Garjasmin
空腸彎曲桿 Gancaonin M
米曲霉 Euphroside
鑲邊鏈霉 Erythrabyssin II
蘇云金芽孢桿 毛萼乙
褐囊蜜環 環氧表國鵝掌楸內酯
阿爾及亞盤多毛孢 Durantoside II
黑曲霉 Durantoside I