詳細介紹
商品介紹:
3PO是一種新型小分子PFKFB3同工酶的抑制劑,顯著衰減幾個人惡性造血細胞和腺癌細胞系的增殖(IC50為1.4-24μM)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:18550-98-6 別名:3PO (inhibitor of glucose metabolism) 純度:99.29% 分子量:210.23 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
3PO | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
蘇云金芽孢桿菌大鼠干因子受體Anti-SSBP1 Antibody人凝血抗凝血復合物(TAT)
綠色木霉大鼠基質衍生因子1βAnti-SSBP2 Antibody人抗凝血受體(ATR)
茶樹菇人落葉型天皰瘡抗體Anti-SSTR4 Antibody人抗凝血受體(ATR)
大腸埃希菌人β2糖蛋白1抗體IgAAnti-SSX1 Antibody人凝血受體(TR)
孢小克銀漢霉大鼠血管生成受體Tie1Anti-SSH3 Antibody人凝血受體(TR)
地衣芽孢桿菌大鼠含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激2Anti-ST18/Znf387 Antibody人第八因子相關抗原(FⅧAg)
山茶盤孢人抗心磷脂抗體IgAAnti-SSH3 Antibody人第八因子相關抗原(FⅧAg)
枯草芽孢桿菌枯草亞種大鼠基質金屬蛋白抑制因子2Anti-ST3GAL3 Antibody人血纖蛋白原(Fbg)
淡紫擬青霉人β2糖蛋白1抗體IgMAnti-STAC2 Antibody人血纖蛋白原(Fbg)
耐堿放線孢菌人β2糖蛋白1抗體IgGAnti-ST6GAL1 Antibody人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)
Bacillus tequilensis大鼠基質金屬蛋白抑制因子3Anti-STARD10 Antibody人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)
粟酒裂殖酵母大鼠基質金屬蛋白抑制因子4Anti-STARD13 Antibody人抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
黑曲霉人抗心磷脂抗體IgMAnti-STEAP2 Antibody人抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
乙鈣不動桿菌人抗心磷脂抗體IgGAnti-STEAP4 Antibody人血栓前體蛋白(TpP)
大腸埃希氏菌大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠAnti-STARD13 Antibody人血栓前體蛋白(TpP)
產短桿菌人抗高爾基體抗體Anti-STEAP3 Antibody人淋巴功能相關抗原3(LFA-3/CD58)
甲狀腺激反應蛋白抗體天麻蜜環菌(京-234)抗P24蛋白單抗7
跨膜蛋白49抗體茯苓578抗人大腸癌單抗7
腫瘤/睪丸抗原20抗體黑木耳(東A-3)抗人微管蛋白-alpha單抗7
腫瘤蛋白D54蛋白抗體散囊菌抗人醛羧A單抗7
小分子PFKFB3同工酶抑制劑(3PO)堅強芽孢桿 異肥皂草苷
黏液桿 異紫堇定堿
纖維鏈霉 銀杏雙黃酮
擬郎比可假絲酵母 魚藤
金灰青霉 異銀杏雙黃酮
屎腸球 異丁酰紫草
黃曲霉 乙酰紫草
熱帶假絲酵母 異丹葉大黃
牛病性腹瀉病 7-乙基
赭曲霉 異連翹酯苷A
Marisediminicola 氧海堿
地衣芽孢桿 異莨菪亭
嗜酸寡養單胞 乙酰天麻
嗜水氣單胞 氧化白藜蘆
蘇云金芽孢桿 乙酰化白藜蘆