詳細介紹
商品介紹:
VX-11e是一種高效的,具有選擇性的ERK抑制劑,Ki值<2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:896720-20-0 純度:98.68% 分子量:500.35 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
VX-11e | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
普通鏈孢囊菌增食欲B/欲激BAnti-ACSL4 Antibody凋亡相關因子(Fas)
根瘤菌鳥脫羧抗體Anti-ACSL5 Antibody凋亡相關蛋白激(DAPK)
厚垣孢普可尼亞菌O位N-乙酰葡萄糖OGT抗體Anti-ACTA1 Antibody凋亡相關半胱肽4(Casp4)
糙皮側耳、平菇(可訂購)少突膠質轉錄因子1Anti-ACTN3 Antibody凋亡蛋白激活因子1(Apaf-1)
副凝聚短狀桿菌陰離子轉運蛋白-1抗體Anti-ACTN3 Antibody凋亡蛋白激活因子1(APAF1)
產硫球鏈菌陰離子轉運蛋白-3抗體Anti-ACVR2A Antibody凋亡蛋白活化因子1(APAF-1)
尖鐮孢 黃瓜專化型催產受體(縮宮受體)抗體Anti-ACTN3 Antibody(PB1079)淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結合家族B成員1(FE65)
黃單胞菌緊密連接蛋白抗體Anti-ACTN4 Antibody淀粉樣前體蛋白(βAPP)
大腸埃希菌卵巢癌免疫反應抗原抗體Anti-ACVR2B Antibody電子轉運黃蛋白-泛醌氧化還原/電子轉運黃蛋白脫氫(ETFDH)
樹舌大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體Anti-ADA Antibody電子轉移黃蛋白β肽(ETFB)
相思根瘤菌神經叢蛋白B1抗體Anti-ADA Antibody電壓門控通道抗體(VGKC-ab)
狹檐薄孔菌磷化蛋白激C(T410)抗體Anti-ADA Antibody(PB0960)電壓門控通道(VGKC)
產黃纖維單胞菌磷化蛋白激C mu型抗體Anti-ADAM10 Antibody第八因子相關抗原(FⅧAg)
擬鬼傘磷化蛋白激C mu型抗體Anti-ADAM15 Antibody第10號染色體缺失并與張力蛋白同源的磷(PTEN/MMAC1)
托魯斯山鏈霉菌表面受體PILRβ抗體Anti-ADAM17 Antibody抵抗樣分子β(RELM-β)
斯氏艾美耳球蟲前列腺癌相關蛋白4抗體Anti-ADAM17 Antibody抵抗(RETN)
成團泛菌Pantoea│agglomerans 質量規格:>98%
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規格:>98%,BR
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質量規格:>98%,BR
ERK抑制劑(VX-11e)聚多曲霉 4-溴-2,6-二纖溶Elisa
蠟樣芽孢桿 含225ml志賀氏増肉湯均質袋纖溶原激活物抑制因子1Elisa
枯草芽孢桿 含100mlGN增液均質袋纖維蛋白原Elisa
頂孢頭孢霉 含225mlGN增液均質袋酰基;膽固酰基轉移Elisa
釀酒酵母 含225mlFB1增液均質袋心肌肌鈣蛋白ⅠElisa
鏈霉 3-氨基-4-甲酸心鈉Elisa
中國臺灣皮斯克氏酵母 含225mlLB1肉湯均質袋血管緊張1-7Elisa
芽胞桿 含225mlmEC+n肉湯均質袋血管緊張??Elisa
膜醭畢赤酵母 含225ml3%堿性蛋白胨水均質袋血管緊張轉化Elisa
假單胞 含100ml緩沖蛋白胨水(BPW)均質袋血管內皮生長因子受體1Elisa
釀酒酵母 4-氨基-2-血管內皮生長因子Elisa
金福菇 含90ml緩沖蛋白胨水(BPW)均質袋血管內皮粘附分子1Elisa
瓜亡革 含900ml緩沖蛋白胨水(BPW)均質袋血管性血友病因子Elisa
奧氏蜜環 含225ml緩沖蛋白胨水(BPW)均質袋血紅氧合1Elisa
雞傷寒沙門氏 4-吡咯烷基吡啶血漿α顆粒膜蛋白Elisa