詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:CFI-402257
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
CFI-402257是高度選選擇性的TTK和Mps1抑制劑,Ki值分別為0.1nM和0.09nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1610759-22-2 純度:99.52% 分子量:498.58 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蘇云金芽孢桿菌小鼠嗜性粒陽離子蛋白Anti-MRPS9 Antibody人金屬硫蛋白2(MT2)
尿八疊球菌兔子白介1可溶性受體IAnti-MRRF Antibody人金屬硫蛋白2(MT2)
西藏根瘤菌菜豆凝集Anti-MSH6 Antibody人可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)
釀酒酵母人上皮粘附分子Anti-MSC Antibody人可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)
腦膜炎膿性黃桿菌(P2實驗室資質證明)大鼠白介32Anti-MRRF Antibody人3-硝基酪(3-NT)
紫丁香蘑兔鉤端螺旋體IgGAnti-MT-ND5 Antibody人3-硝基酪(3-NT)
燕麥鐮刀菌人可溶性粘附分子Anti-MSX2 Antibody人糖聚糖(GAG)
孢小克銀漢霉輪生變種扁豆凝集Anti-MTAP Antibody人糖聚糖(GAG)
黃蓋蜜環菌小鼠Qa淋巴抗原2Anti-MT-ND1 Antibody人半胱酰白三烯(CysLTs)
蜜二糖假絲酵母大鼠孕受體Anti-MT-ND5 Antibody人半胱酰白三烯(CysLTs)
糞產堿桿菌兔凝血原片段F1+2Anti-MTG2 Antibody人鈣腔蛋白(CALU)
谷棒桿菌蓖麻凝集Anti-MTERF1 Antibody人鈣腔蛋白(CALU)
枯草芽孢桿菌小鼠D-乳脫氫Anti-MTERF1 Antibody人載脂蛋白A5(apo-A5)
彩色豆馬勃人巨噬替代激活相關化學因子1Anti-MTNR1A Antibody人載脂蛋白A5(apo-A5)
雙孢蘑菇大鼠白介21Anti-MTIF3 Antibody人維生D結合蛋白(DBP)
柄孢殼豌豆凝集Anti-MTNR1B Antibody人維生D結合蛋白(DBP)
受體活性修飾蛋白3抗體元蘑人高轉移性乳腺癌細胞
Ras蛋白特異鳥核苷釋放因子1抗體粗毛纖孔菌人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞
視網膜S抗原抗體樺革裥菌大鼠肝星形細胞
RB1的誘導卷曲蛋白RB1CC1抗體鐮霉菌人胚腎上皮包裝細胞
TTK和Mps1抑制劑(CFI-402257)溶血不動桿基因型4 3,6-Dimethoxyapigenin
毛栓 2'-Hydroxygenistein
紡錘形毛殼 2,6-Dimethyl-3,7-octadiene-2,6-d
毛木耳(紫木耳、黃背木耳) 2,3,8-三鄰甲基鞣花酸
黑木耳(神龍A8) 14-去氧-11,12-二去氫內酯
球孢枝孢 11(13)-去氫腋生依瓦菊
小紅酵母 1-(3,4-Dimethoxyphenyl)propane-1
畢赤酵母 β-Hydroxypropiovanillone
立枯絲核 α-育亨賓
枯草芽孢桿 原間千金藤堿
運動節桿 p-Hydroxyphenethyl trans-ferulat
Flavihumibacter 鐵力木咕噸酮 A
毛柄(金針菇) Masticadienolic acid
屎腸球 羽扇豆鹼
皺紋單胞 異落葉松脂