公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):廣譜Aurora激酶抑制劑(AMG 900)
英文名稱(chēng):AMG 900
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
AMG900是一種有效的選擇性的廣譜Aurora激酶抑制劑,作用于Aurora A,B和C,IC50分別為5nM,4nM和1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):945595-80-2 純度:99.30% 分子量:503.58 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏菌外致密纖維尾部蛋白4抗體Anti-ACE Antibody對(duì)稱(chēng)二甲基精(SMDA)
Vibrio variabilis 2'-5'-寡腺苷合成2抗體Anti-ACAA2 Antibody(PB1075)對(duì)基甲(PABA)
貝氏谷桿菌µ-型阿片受體抗體Anti-ACACB Antibody端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2(TERF2)
距園毛霉磷化D型阿片受體抗體Anti-ACADS/SCAD Antibody端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(TERF1)
卷枝毛霉含氧轉(zhuǎn)移1抗體Anti-ACADVL Antibody端粒逆轉(zhuǎn)錄(TERT)
釀酒酵母抑瘤M抗體Anti-ACE Antibody端粒(TE)
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌抑瘤M受體抗體Anti-ACE Antibody端粒保護(hù)蛋白1(POT1)
發(fā)酵性酵母鋅指蛋白339抗體Anti-ACE Antibody(PB0089)蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)
鹽水球菌氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體Anti-Aconitase 1/ACO1 Antibody蕈堿型乙酰受體(M-AChR)
唐菖蒲青霉氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體Anti-ACHE Antibody性休克綜合征1(TSST-1)
發(fā)根根瘤菌固生蛋白M抗體Anti-ACKR2 Antibody疊氮胸苷(AZT)
毛栓孔菌末端多聚腺苷1蛋白抗體Anti-ACHE Antibody凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)
盤(pán)長(zhǎng)孢菌*嗅球蛋白3抗體Anti-ACO2 Antibody凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)
庫(kù)氏類(lèi)芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子OTX1抗體Anti-ACSL1 Antibody(PB1078)凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激I(ASK-1)
鱗蓋紅菇轉(zhuǎn)錄因子OTX2抗體Anti-ACLY Antibody(PB1100)凋亡相關(guān)因子配體(FASL)
有柄靈芝轉(zhuǎn)錄因子OTX1+OTX2抗體Anti-ACSL3 Antibody凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)
蘇云金芽胞桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,5合物
緩癥鏈球菌Streptococcus│mitis 質(zhì)量規(guī)格:>95%,進(jìn)口
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分
廣譜Aurora激酶抑制劑(AMG 900)紫云英根瘤 Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基管松弛Elisa
宇佐美曲霉 安息香二甲(DMPA)髓過(guò)氧化物Elisa
凍膠假絲酵母 Amies運(yùn)送培養(yǎng)基管髓磷脂堿性蛋白Elisa
柔嫩艾美耳球蟲(chóng) 瓷珠種保存管(20支)髓鞘堿性蛋白抗體Elisa
枯草芽孢桿 瓷珠種保存管(50支)胎盤(pán)生長(zhǎng)因子Elisa
羅倫隱球酵母羅倫變種 PH6.8磷酸鹽緩沖液糖聚糖Elisa
空腸彎曲桿 6-甲基-1-茚酮天冬氨酸蛋白Elisa
大腸埃希氏桿 PH7.0的NaCl蛋白胨緩沖液天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa
大腸埃希氏桿 0.1%蛋白胨水同型半胱氨酸Elisa
芽枝狀枝孢 含200ml鹽水均質(zhì)袋透明質(zhì)酸Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 含200ml鹽水均質(zhì)袋晚期糖基化終末產(chǎn)物受體Elisa
拉曼被孢霉 L-苯氨酸芐酯鹽酸鹽胃泌Elisa
南方散斑殼 含225ml布氏肉湯均質(zhì)袋間粘附分子1Elisa
長(zhǎng)枝木霉 含22%胰酪胨大豆肉湯均質(zhì)袋細(xì)脂蛋白Elisa
腸桿 含50ml7.5%肉湯均質(zhì)袋纖連蛋白Elisa