詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:EED226
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
EED226是高效選擇性的胚胎外胚層發育(EED)抑制劑,IC50值為22nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:2083627-02-3 純度:98.70% 分子量:369.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
南方靈芝白介-7受體a抗原Anti-CSF2RA Antibody人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)
ATCC 9763生長抑制因子基因1抗原Anti-CSF2RB Antibody人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)
*安絡小皮傘菌、鬼毛針、黑柄皮傘菌抑制α抗原Anti-CSH1 Antibody人腫瘤壞死因子β(TNF-β)
枯斑擬盤多毛孢抑制beta A抗原Anti-CSNK1G1 Antibody人腫瘤壞死因子β(TNF-β)
球孢白僵菌抑制βB抗原Anti-CSNK1G2 Antibody人腫瘤壞死因子α(TNF-α)
大腸埃希菌整合α3抗原Anti-CSGALNACT1 Antibody人腫瘤壞死因子α(TNF-α)
*味牛肝菌整合β5抗原Anti-CSNK1G2 Antibody人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)
地生鱗傘整合α1抗原Anti-CSRNP2 Antibody人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)
草色串孢整合α4β7抗原Anti-CSNK2A1 Antibody人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)
檸檬色節桿菌整合αE2抗原Anti-CSRP1 Antibody人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)
pYes2/CTENPP3抗原Anti-CSRL1 Antibody人轉化生長因子β1(TGF-β1)
小青霉支架蛋白抗原Anti-CSRNP3 Antibody人轉化生長因子β1(TGF-β1)
臭曲霉澀變種干擾調節因子抗原Anti-CST11 Antibody人轉化生長因子α(TGF-α)
葡萄座腔菌白介-1受體相關激2Anti-CST3 Antibody人轉化生長因子α(TGF-α)
解脂亞羅酵母白介-1受體拮抗劑抗原Anti-CST1 Antibody人基質衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)
球狀枝孢整合α7抗原Anti-CST1 Antibody人基質衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)
PSD95相關緊密連接蛋白PATJ抗體熒光假單胞菌人成巨核細胞白血病細胞
PDZ結構域PDZK9蛋白抗體南方樹舌人紅白細胞白血病細胞
脂滴包被蛋白A+B抗體木層孔菌人甲狀腺癌細胞BHT101(干細胞庫保藏)
原鈣粘蛋白β5抗體平蓋靈芝(樹舌)綠色熒光蛋白標記人宮頸癌細胞
胚胎外胚層發育(EED)抑制劑(EED226)波楚普鏈霉 7,8,9,9-Tetradehydroisolaricires
枯草芽胞桿 6-Deoxyjacareubin
松口蘑 6',7'-Dihydroxybergamottin aceto
新月彎孢霉 4'-Demethyleucomin
解烷烴游動微* 3-Hydroxybakuchiol
枯草芽孢桿 3,4-Secocucurbita-4,24-diene-3,2
紫紅曲 23-Hydroxymangiferonic acid
普茅斯沙雷氏 21,24-Epoxycycloartane-3,25-diol
羊無漿體(西吉株) 2",4"-Di-O-(E-p-coumaroyl)afzeli
豌豆根瘤 1-Deacetylnimbolinin B
弗吉尼亞鏈霉 14-Deoxycoleon U
黑曲霉 14-Deoxy-11-hydroxyandrographoli
血紅紅曲霉 10-O-Caffeoyl-6-epiferetoside
金針菇 (+)-Lyoniresinol 9'-O-glucoside
膠凍樣芽孢桿 Vinorine