詳細介紹
商品介紹:
UMI-77是一種新型Mcl-1SMI選擇性抑制劑,結合至Mcl-1BH3結構溝,Ki值為490nM,對抗凋亡的Bcl-2家族其他成員具有選擇性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:518303-20-3 純度:98.04% 分子量:468.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
UMI-77 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
華麗側耳(佛羅里達側耳)絲蛋白/線粒體絲蛋白多肽抗原Anti-COX15 Antibody人白介18(IL-18)
水稻節桿菌離子鈣接頭蛋白抗原Anti-COX11 Antibody人白介18(IL-18)
青春雙歧桿菌小腸型脂肪結合蛋白抗原Anti-COX17 Antibody人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)
枯草芽孢桿菌干擾誘導跨膜蛋白1抗原Anti-COX19 Antibody人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)
乳鏈球菌干擾-α抗原(人)Anti-COX7A2P2 Antibody人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)
金黃桿菌屬干擾-gamma受體1抗原Anti-COX6C Antibody人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)
泛枝芽胞桿菌胰島樣生長因子結合蛋白-2(多肽)Anti-COX7A2P2 Antibody人B活化因子受體(BAFF-R)
魯氏毛霉胰島樣生長因子結合蛋白-3抗原Anti-CPA1 Antibody人B活化因子受體(BAFF-R)
空泡單胞菌胰島樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原Anti-COX5A Antibody人血管內皮生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)
假單胞菌KB抑制蛋白β(多肽)Anti-CPA5 Antibody人血管內皮生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)
豇豆慢生根瘤菌KB抑制蛋白α抗原Anti-CPE Antibody人血管內皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)
考夫梅奇酵母 白介12抗原(白介-12)Anti-CPE Antibody人血管內皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)
假諾氏菌白介12抗原(人)Anti-CPN1 Antibody人血管內皮生長因子D(VEGF-D)
木霉屬白介-12受體β2抗原Anti-CPA5 Antibody人血管內皮生長因子D(VEGF-D)
枯斑擬盤多毛孢白介13抗原Anti-CPNE8 Antibody人血管內皮生長因子C(VEGF-C)
野油菜黃單胞菌白介14抗原Anti-CPNE8 Antibody人血管內皮生長因子C(VEGF-C)
受體P2X7抗體大腸埃希氏菌(大腸桿菌)人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞
三磷腺苷受體受體P2X1抗體乙型副傷寒沙門氏菌人喉癌細胞
三磷腺苷受體P2X5抗體短小芽孢桿菌人免疫球蛋白lambda骨髓瘤細胞
三磷腺苷受體P2X5b抗體費氏志賀氏菌人B淋巴瘤細胞
Mcl-1SMI抑制劑(UMI-77)紅菇屬* Ligucyperonol
黃色籃狀 樟葉木防己堿
微紫青霉 Kaerophyllin
枯草芽孢桿 堪 3-O-阿伯糖苷
擬青霉 異迪紫檀
硬水土地桿 Goniopypyrone
枯草芽孢桿 Glepidotin B
大腸埃希氏 Gelsemiol
宋氏志賀氏 靈芝A
泡囊側耳(鮑魚菇) 楝葉吳萸 B
白阿魏菇 Eurycarpin A
大腸埃希氏 桐阿亭
土曲霉原變種 ent-16α,17-Dihydroxyatisan-3-one
鏈格孢 埃奇
金針菇 Dihydroresveratrol 3-O-glucoside