公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):MEK1/2抑制劑(AZD8330)
英文名稱(chēng):AZD8330
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
AZD8330(ARRY-424704;ARRY-704)是非ATP競(jìng)爭(zhēng)性MEK1/2抑制劑,IC50為7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):869357-68-6 別名:ARRY-424704;ARRY-704;AZD8330 分子量:461.23 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鮮綠青霉人乙酰化Bacillus cereus小鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)
丁梭菌人異檸檬脫氫Bacillus cereus小鼠紅生成(EPO)
釀酒酵母人原ⅡBacillus cereus小鼠紅生成(EPO)
香菇人腺苷脫Bacillus cereus小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)
鐮刀菌屬人透明質(zhì)Bacillus cereus小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)
枯草芽孢桿菌人天門(mén)冬基轉(zhuǎn)移Bacillus cereus小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)
粘孢白僵菌人性磷Bacillus cereus小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)
雞白痢雞傷寒多價(jià)染色平板凝集抗原參照品人葡萄糖6磷異構(gòu)Bacillus cereus小鼠Slit2
比基尼鏈霉菌人磷葡萄糖變位Bacillus cereus小鼠Slit2
黃色桿菌屬人亮酰基肽Bacillus cereus小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
白蠟傘人鏈激Bacillus cereus小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
靈芝人核糖核Bacillus cereus小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)
無(wú)人過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物Bacillus cereus小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)
豐加鏈霉菌人芳基硫酯ABacillus cereus小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
嗜熱鏈球菌人對(duì)氧磷Bacillus cereus小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
暗孢節(jié)菱孢人激Bacillus cereus小鼠降鈣原(PCT)
X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白3抗體卵孢白僵菌小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞
DNA損傷修復(fù)ERCC3蛋白抗體*紫穗槐根瘤菌倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,(二氫葉還原缺陷)
腫瘤/睪丸抗原12家族2抗體#刺托竹蓀洲綠猴胚胎腎細(xì)胞
乙型肝炎X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體#鐮刀菌人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
MEK1/2抑制劑(AZD8330)致密木霉 檸檬酸
蠟狀芽孢桿 狗牙花堿D乙
米根霉 狗牙花堿D
香菇(Cr66) 高車(chē)前
褐球固氮(未復(fù)核可換ACCC10006) 廣防風(fēng)苷A
賴(lài)芽胞桿屬 喹酮
克雷伯氏 齊特
高盧蜜環(huán) 枸橘苷
淡黃木霉 苯脲
慢生根瘤 高車(chē)前苷
雅致放射毛霉 佛手柑
植物乳桿 西紅柿堿
博伊丁假絲酵母 洲防己堿
產(chǎn)朊假絲酵母
伊平屋橋大洋芽孢桿 知母皂苷BIII