詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Diphylline | 1mL(10mM)|100mg|500mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Dyphylline是腺苷受體拮抗劑和PDE抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:479-18-5 別名:Diprophylline 純度:99.28% 分子量:254.24 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
龍血竭(標準品)英文名稱: 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole微小染色體維持缺陷蛋白7抗體包裝25g
龍血A(標準品)英文名稱: 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazoleE3泛連接MUL1抗體包裝5g
龍芽楤木(標準品)英文名稱: 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole纖微絲相關糖蛋白2抗體包裝5g
龍眼肉(標準品)英文名稱: 3-Quinuclidinone HCl肥大類糜蛋白1抗體包裝5MG
漏蘆(祁州漏蘆)(標準品)英文名稱: Irsogladine硝唑單克抗體包裝100g
蘆丁/蕓香葉苷(標準品)英文名稱: ADA monosodium salt線粒體核糖體蛋白L12抗體包裝25g
蘆根(標準品)英文名稱: ADA disodium salt線粒體核糖體蛋白L39包裝1g
蘆薈(好望角蘆薈)(標準品)英文名稱: ADA脫氫激1抗體包裝250mg
蘆薈大黃(標準品)英文名稱: (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine絲裂原活化的蛋白激p38β抗體包裝5g
蘆薈苷(標準品)英文名稱: Prednisolone phosphate sodium核基質蛋白3抗體包裝1g
蘆薈苷B(標準品)英文名稱: DMT-CL組織相容性復合體蛋白1抗體包裝5g
蘆薈新甙D(標準品)英文名稱: N-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon組織相容性復合體蛋白2抗體包裝1g
蘆筍(標準品)英文名稱: 6-Chloroguanosine轉化因子樣蛋白4抗體包裝250mg
蘆竹根(標準品)英文名稱: ITP•Na3NADH復合體5抗體包裝5g
蘆竹堿(標準品)英文名稱: GTP.Na2肌微管1抗體包裝1g
: AS3.4357資源名稱: 納地青霉 質量規格:>99%,BR抗磷脂酰膽堿抗體試劑盒沒食子兒茶;Gallocatechin
阿魏側耳Pleurotus│fuscus var. ferulae Lanzi 質量規格:>98%,BR,可用于培養抗磷脂酰膽堿抗體試劑盒二乙烯苷;tetrahydroxyl
柄孢殼菌Podospora│cochleariformis 質量規格:>98%,BR抗磷壁抗體試劑盒二氫麻醉椒苫 ;dihydrometh
腺苷受體拮抗劑和PDE抑制劑(Diphylline)整合alpha E2抗原鹽羅通定(標準品)Human, Mouse
巨噬表面分子抗原鹽洛美沙星(標準品)Human, Mouse, Rat
v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌因同源物A抗原鹽馬尼地平(標準品)Human, Mouse
黑色瘤相關鹽馬普替林(標準品)Human, Mouse, Rat
絲裂原活化蛋白激激1抗原鹽嗎啉胍(標準品)Human, Mouse
凋亡信號調節激1/絲裂原活化蛋白激激激5抗原鹽美金剛(標準品)Human, Mouse
抑癌因抗原鹽美利曲辛(標準品)Human
蛋白裂解(一種新的癌因)抗原鹽美司坦(標準品)Human
人巨病UL49抗原鹽美西律(標準品)Human, Mouse, Rat