詳細介紹
商品介紹:
PFK-158是一種有效的選擇性PFKFB3抑制劑,目前對晚期實體瘤研究處于臨床一期階段。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1462249-75-7 純度:98.11% 分子量:328.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PFK-158 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
豌豆根瘤菌流感病A抗原Anti-CNOT2(Ab-101) Antibody人血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)
雞傷寒沙門氏菌組蛋白H2AX多肽抗原Anti-CNOT2 Antibody人血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)
大豆莖潰瘍菌流感病A抗原Anti-CNOT7 Antibody人CXC趨化因子配體16(CXCL16)
泛養副球菌流感病A抗原Anti-CNP Antibody人CXC趨化因子配體16(CXCL16)
百脈根中間根瘤菌透明質/玻璃抗原Anti-CNP Antibody人CXC趨化因子受體3(CXCR3)
赭色擲孢酵母HA tag標簽多肽Anti-CNOT7(CAF1) pAb人CXC趨化因子受體3(CXCR3)
球形阜孢HA tag標簽(分支多肽)Anti-CNR2 Antibody人γ干擾誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)
枯草芽孢桿菌肝生長因子激活物抑制因子抗原Anti-CNTN2 Antibody人γ干擾誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)
地衣芽孢桿菌人類血紅蛋白α1抗原Anti-CNTN2 Antibody人基質衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)
類干酪乳桿菌類干酪亞種乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原Anti-CNTFR Antibody人基質衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)
嗜鹽喜鹽芽胞桿菌乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原Anti-CNTN5 Antibody人淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)
窄食單胞菌肝炎病X蛋白(HBxAg)C端抗原Anti-CNTD2 Antibody人淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)
串珠鐮孢人α亞基人絨毛膜促性腺激多肽抗原Anti-CNTN6 Antibody人α干擾(IFN-α)
約氏不動桿菌膀胱腫瘤抗原Anti-COL11A1 Antibody人α干擾(IFN-α)
固氮菌c-erbB-2受體抗體(N端)Anti-COL13A1 Antibody人可溶性CD86(B7-2/sCD86)
韓國游動微菌c-erbB-2受體抗原(N端)Anti-CNTROB Antibody人可溶性CD86(B7-2/sCD86)
NADPH氧化活化蛋白p47抗體酪丁梭菌人甲狀腺癌細胞
成對樣同源結構域轉錄因子2抗體長雙歧桿菌人胃腺癌細胞(低分化)
多腺苷二磷多聚16抗體白色葡萄球菌小鼠垂體瘤細胞
G蛋白偶聯受體p2y10抗體威爾氏李斯特菌大鼠膠質瘤細胞
PFKFB3抑制劑(PFK-158)三棱孢小囊 N-乙?;?4-酮
枯草芽孢桿 鞘磷脂
塔斯曼尼亞弧 間羥基聯苯
米曲霉 2-羰基丁酸鈉鹽
渾圓鏈霉 辣椒堿(合成)
Bacillus aryabhattai 苯甲脒
黏液威克斯氏 吡啶乙酸鹽酸鹽
外外安德倫茨氏 9-氨基吖啶鹽酸鹽一水合物
土壤桿 3-甲基
硬結節桿 乙二四乙酸三鈉
枯草芽孢桿 香草乙酮
澳型核果褐腐病 聚乳酸
綠木霉 12-Deoxo-12α-acetoxyelliptone
單胞 12-Hydroxy-8(17),13-labdadien-16
釀酒酵母 13-Epijhanol