商品介紹:
VX-222(VCH-222)是新型的HCV聚合酶選擇性抑制劑,對(duì)NS5B1a和NS5B1b的IC50分別為0.94和1.2μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1026785-59-0 別名:VCH-222 純度:99.76% 分子量:445.61 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
HCV聚合酶抑制劑(VX-222) | VX-222 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
羚羊角(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid脂肪瘤相關(guān)蛋白抗體包裝5g
硫基葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): TAPS層粘連蛋白β4抗體包裝5MG
硫長(zhǎng)春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): LY294002黃體激釋放激/促性腺激釋放激抗體包裝1g
硫黃連堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): SHES蛋白賴(lài)-6-氧化抗體包裝5g
硫氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): PHES白酪激受體抗體包裝25g
硫軟骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): AHES同源盒轉(zhuǎn)錄因子LMX1A抗體包裝5g
硫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): HES轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
柳穿魚(yú)黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): DIPSO Monosodium狂躁基因同源蛋白MFNG抗體包裝5g
龍膽(堅(jiān)龍膽)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): DIPSOE3泛蛋白連接MIB1抗體包裝100g
龍膽(龍膽)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): DMPS主導(dǎo)控制樣蛋白1抗體包裝25g
龍膽花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): CHPS-Na主導(dǎo)控制樣蛋白2抗體包裝500g
龍膽苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sodium 2-bromoethanesulphonate絲裂原活化蛋白激6抗體包裝100g
龍膽;2,5-二羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): BICINE磷化絲/蘇蛋白激MST4,MST3,STK25抗體包裝25g
龍脷葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): BES Sodium Salt表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白Megf10抗體包裝1g
龍腦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): BES free acidMPP4蛋白抗體包裝5g
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:99%,santa進(jìn)口原裝sc-203765抗磷脂酰甘油抗體試劑盒β,β’-二基烯酰阿卡寧;β, β-
中國(guó)動(dòng)性微菌Planomicrobium│chinense 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR抗磷脂酰甘油抗體試劑盒3,29-二酰基栝樓仁三;3,29
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR培養(yǎng)級(jí)抗磷脂酰膽堿抗體試劑盒二羥茶堿E;Coronarin E
HCV聚合酶抑制劑(VX-222)真核翻譯起始因子3A抗體安格洛苷 C(標(biāo)準(zhǔn)品) Giemsa stain
磷化真核翻譯起始因子4G抗體安石榴甙(標(biāo)準(zhǔn)品) 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester
整合α4β7抗體安五脂(標(biāo)準(zhǔn)品) 6-Carboxyfluorescein
磷化干擾調(diào)節(jié)因子3抗體安息香(標(biāo)準(zhǔn)品) 5-Carboxyfluorescein
ISLR2蛋白抗體澳茄新(標(biāo)準(zhǔn)品) Nigrosine water soluble
IQCG蛋白抗體澳洲茄;澳州茄(標(biāo)準(zhǔn)品) Nigrosin alcohol soluble
IQCK蛋白抗體澳洲茄邊(標(biāo)準(zhǔn)品) 7-Hydroxycoumarin
DNA結(jié)合抑制因子1抗體澳洲茄(標(biāo)準(zhǔn)品) Hemin
肌苷單磷脫氫1抗體八角楓(標(biāo)準(zhǔn)品) 5-Carboxyfluorescein diacetate