PAK1抑制劑(G-5555)公司*的產(chǎn)品：F X III (Human coagulation factor X III ) ELISA Kit 人凝血因子ⅩⅢ鋇 AR，99%
F III (Human coagulation factor III 0 ELISA Kit 人凝血因子Ⅲ鋇 99.99% metals basis
C1q(Human Complement 1q) ELIS

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

Corynebacterium urealyticum RAS蛋白樣激活劑1抗體Anti-EIF4A1 Antibody異染色質(zhì)蛋白1(HP1)

中慢生華癸根瘤菌Ras相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2抗體Anti-ELANE Antibody異檸檬脫氫2(IDH2)

殺鮭氣單胞菌抑癌基因PDLIM4抗體Anti-EIF4A2 Antibody(PB0807)異檸檬脫氫1(IDH1)

糙孢籃狀菌RAS抑制蛋白1抗體Anti-EIF4G1 Antibody異連蛋白β(DTNβ)

彎孢周期D相關(guān)蛋白抗體Anti-EIF6 Antibody(PB0611)異連蛋白α(DTNα)

谷棒桿菌Rho家族GTP3抗體Anti-ELAVL2 Antibody乙酰乙酰合成(AACS)

佛羅里達(dá)側(cè)耳環(huán)指蛋白139抗體Anti-ELP3 Antibody乙酰復(fù)合-O-甲基轉(zhuǎn)移(ASMT)

葡萄座腔菌Rho GTP激活蛋白29抗體Anti-ELAVL4 Antibody乙酰乙酰轉(zhuǎn)移2(ACAT2)

假單胞菌食道癌抑制生長(zhǎng)蛋白抗體Anti-ELF3 Antibody乙酰(A-CoA)

黑曲霉RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Anti-ELF1 Antibody乙酰酯關(guān)聯(lián)蛋白(ACHAP)

波蘭青霉雄激受體相關(guān)蛋白24抗體Anti-EMD Antibody乙氧化1(AOX1)

猴頭菌癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab25抗體Anti-EML4 Antibody乙基二腦病變基因1(ETHE1)

蘇云金芽胞桿菌核受體RXRβ抗體Anti-EME1 Antibody乙二Ⅰ(GLO1)

大腸埃希氏菌維甲受體γ抗體Anti-ENG Antibody乙脫氫7(ADH7)

蠟狀芽孢桿菌磷化Rho相關(guān)蛋白激1抗體Anti-ENG Antibody乙脫氫6(ADH6)

母雞乳桿菌視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白P48抗體Anti-ENG Antibody乙脫氫5(ADH5)

長(zhǎng)柄木霉Trichoderma│longbrachiatum 質(zhì)量規(guī)格：0.98

塔賓曲霉Aspergillus│tubingensis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：0.98
PAK1抑制劑(G-5555)油菜假單胞 R2A瓊脂促胃泌受體抗體Elisa

紅色蠟?zāi)?/span> 鼠李糖發(fā)酵管組織型纖溶原激活劑Elisa

黑根霉 色氨酸肉湯β半乳甘露聚糖Elisa

米根霉 葡萄糖銨半乳甘露聚糖Elisa

釀酒酵母 鳥(niǎo)氨酸脫羧肉湯α半乳甘露聚糖Elisa

阿舒多囊霉 葡萄糖半固體細(xì)環(huán)病1Elisa

蓋氏假單胞 V-P半固體瓊脂細(xì)環(huán)病2Elisa

伯克霍爾德氏屬 ONPG肌酸激同工Elisa

膠孢 5%乳糖發(fā)酵管天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

生活飲用水  大腸埃希氏 七葉苷乳酸脫氫Elisa

青霉  棉子糖發(fā)酵管氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

類銀白紫絲膜 西蒙氏枸櫞酸鹽α-羥丁酸脫氫Elisa

 水楊苷發(fā)酵管酮酸激Elisa

黑木耳 二酸鹽果糖-二磷酸縮Elisa

損蘑菇紫色桿 山梨發(fā)酵管磷酸葡萄糖異構(gòu)Elisa