詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:BTK抑制劑(ONO-4059)
英文名稱:ONO-4059
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
ONO-4059是一個高的,有選擇性的BTK抑制劑,IC50值是2.2nM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1351636-18-4 別名:GS-4059 純度:98.31% 分子量:454.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
弗蘭克氏菌磷化急性髓白血病1蛋白抗體Anti-EGFR Antibody易位蛋白1(TLOC1)
污黑腐皮殼磷化蛋白體PSMβ7抗體Anti-EGR1 Antibody抑制結合蛋白(INHBP)
短短芽胞桿菌根蛋白抗體Anti-EGR1 Antibody抑制βE(INHβE)
洋蔥青霉視網膜母瘤樣蛋白2抗體Anti-EGR2 Antibody抑制βC(INHβC)
新疆鹽紅菌維甲受體G抗體Anti-EHD1 Antibody抑制βB(INHβB)
耐林丹黃桿菌Rho GTP激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關蛋白抗體Anti-EIF2AK2 Antibody抑制βA(INHβA)
熒光假單胞菌磷化Rho GTP激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關蛋白抗體Anti-EIF2AK2 Antibody抑制B(INHB)
腐皮鐮孢菌環指蛋白87Anti-EIF2AK3 Antibody抑制蛋白β2(ARRβ2)
枯草芽孢桿菌磷化RhoA蛋白抗體Anti-EIF2AK3 Antibody抑制蛋白β1(ARRβ1)
東方伊薩酵母衰老抑制基因蛋白抗體Anti-EIF2B1 Antibody抑絲蛋白4(PFN4)
萊比托游動球菌中間絲相關蛋白抗體Anti-EIF2AK4 Antibody抑絲蛋白3(PFN3)
熱帶假絲酵母環指蛋白86Anti-EIF2S1 Antibody抑絲蛋白2(PFN2)
中山乳芽胞桿菌中山亞種環指蛋白2抗體Anti-EIF2S2 Antibody抑絲蛋白1(PFN1)
猴頭菌環指蛋白44抗體Anti-EIF3E Antibody抑瘤M受體(OSMR)
黑木耳環指蛋白40抗體Anti-EIF4A1 Antibody異粘蛋白(MTDH)
松口蘑環指蛋白8抗體Anti-EIF3B Antibody異戊烯半胱氧化1(PCYOX1)
小單孢菌Micromonospora│sp. 質量規格:>98,BR
盤多毛孢Pestalotia│sp. 質量規格:>99%
擬青霉Paecilomyces│sp. 質量規格:>98.5%,BR
BTK抑制劑(ONO-4059)蠟狀芽孢桿 甘露發酵管固酮Elisa
黑曲霉 木糖發酵管肉絳蟲IgG抗體Elisa
桿狀毛霉 鼠李糖發酵管肉絳蟲IgM抗體Elisa
波氏假性阿利什霉 硝酸鹽肉湯堿性成纖維生長因子Elisa
三葉草根瘤 3%NaCl乳糖口蹄疫病Elisa
洛斯里被毛孢 10%NaCl胰胨水B-趨化因子1Elisa
金福菇 7%NaCl胰胨水繆勒管抑制物質;抗繆勒管Elisa
壁芽孢桿 無鹽胰胨水功能相關抗原1Elisa
蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 麥芽糖巨噬替代激活相關化學因子1Elisa
裂褶 葡萄糖熱休克蛋白70Elisa
釀酒酵母 甘露發酵管囊尾蚴病Elisa
草木樨中華根瘤 木糖發酵管抗單鏈DNA抗體Elisa
平菇(PL185) 鼠李糖發酵管色氨酸Elisa
大豆慢生根瘤 硝酸鹽肉湯肌紅蛋白Elisa
沃氏富鹽 木糖發酵管載脂蛋白A1Elisa