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詳細介紹
產品屬性：
英文名稱：Ro 5126766
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
商品介紹：
Ro5126766(CH5126766)是一種強效的選擇性雙重RAF/MEK抑制劑,抑制SK-MEL-28,SK-MEL-2,MIAPACA-2,和SW480細胞系中,IC50值分別為為65,28,40,和46nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：946128-88-7 別名：CH5126766 純度：98.0% 分子量：471.46 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
黃銹傘Cy3標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADCK2 Antibody脫氫β(PDHβ)
赭色擲孢酵母Cy5標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADCK5 Antibody脫氫α(PDHα)
竹針孢座囊菌Anti-ADCY3 Antibody羧化(PC)
釀酒酵母Anti-ADCY4 Antibody糖磷異構1(TPI1)
耐冷冷桿菌Anti-ADCY5 Antibody肽(AAP)
棲稻黃色單胞菌Anti-ADCY6 Antibody/絲/半胱/蘇轉運蛋白(ASCT1)
釀酒酵母Anti-ADCY9 Antibody別孕烯(AP)
無環田頭菇Anti-ADD2 Antibody表皮轉谷酰(TGM3)
煙色擬盤多毛孢Anti-ADD3 Antibody表皮調節(EREG)
球孢白僵菌Anti-ADGRA1 Antibody表皮生長因子途徑底物蛋白3(EPN3)
八孢裂殖酵母Anti-ADD1 Antibody表皮生長因子途徑底物蛋白2(EPN2)
弗雷德里克斯堡假單胞菌牛血清白蛋白（第五組分）Anti-ADCY8 Antibody表皮生長因子途徑底物蛋白1(EPN1)
華根霉FITC標記蛋白-GAnti-ADGRA2 Antibody表皮生長因子受體2(EGFR2)
多黏類芽孢桿菌膽固Anti-ADGRB2 Antibody表皮膜蛋白3(EMP3)
弗蘭克氏菌β淀粉樣肽1-16（多肽蛋白）Anti-ADGRB1 Antibody表面活性物質關聯蛋白J(SPJ)
Corynebacterium variabileβ淀粉樣肽31-35（多肽蛋白）Anti-ADGRD2 Antibody表面活性物質關聯蛋白D(SPD)
過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體粟褐芽孢桿菌大鼠胰腺組織提取物
p53調節凋亡誘導蛋白1抗體沙門氏菌IV大鼠乳腺組織提取物
泛甲基賴抗體熏衣草灰鏈霉菌大鼠淋巴組織提取物
磷脂爬行3抗體淺灰鏈霉菌杭州變種大鼠卵巢組織提取物
RAF/MEK雙重抑制劑(Ro 5126766)皺折曲霉 Obtucarbamate B
谷氨酸棒桿 Neochamaejasmin B
黑木耳 Neochamaejasmin B
產氨棒桿 5,7,4'-Trihydroxy-3,6-dimethoxy
釀酒酵母 4-Hydroxy-11,12,13-trinor-5-eude
淺白隱球酵母 3α-Angeloyloxypterokaurene L3
微孢毛霉 3-Epiakebonoic acid
米根霉 28-Deoxonimbolide
弗雷德里克斯堡假單胞 15-Dihydroepioxylubimin
微白黃鏈霉 10-O-Methylprotosappanin B
乳酒假絲酵母 1,7-二(4-羥基苯基)-6-庚烯-3-酮
深紅紅螺* （Z）-阿枯米定堿
平臍蠕孢 Vandrikidine
Rufibacter Sulfocostunolide A
沖擊地土地桿 繡線菊堿A
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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