詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:Disitertide
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
Disitertide(P144)是TGF-β1的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:272105-42-7 別名:P144;P144 Peptide 純度:98.12% 分子量:1580.82 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
巴斯德畢赤酵母PE標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR1 Antibody補體應答基因32(RGC32)
產氣莢膜梭菌 A型PE-Cy3標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR2 Antibody補體因子P(CFP)
軍威鎮梅奇酵母PE-CY5標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR3 Antibody補體因子H相關蛋白3(CFHR3)
植物乳桿菌植物亞種APC標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR2 Antibody補體因子B(CFB)
藤黃淺藤黃鏈霉菌Cy3標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR4 Antibody補體受體4(CR4)
韓國游動微菌Alexa Fluor 555標記的驢抗羊IgGAnti-ACOT1 Antibody補體受體2(CR2)
黑曲霉PE-Cy7標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR4 Antibody補體成分9(C9)
嗜乳桿菌膠體金標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACOT12 Antibody補體成分8γ(C8γ)
短波單胞菌PE-Cy5.5標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACOT12 Antibody補體成分8β(C8β)
山梨木糖假絲酵母Cy3標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACOT4 Antibody補體成分7(C7)
器腐霉Alexa Fluor 488標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACOT13 Antibody補體成分6(C6)
害艾美耳球蟲Cy5.5標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACOT2 Antibody補體成分5a(C5a)
黑木耳PE-CY5標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACOT8 Antibody補體成分5(C5)
蘋果黑腐皮殼菌APC標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACRBP Antibody補體成分4d(C4d)
燼灰孢鏈霉菌堿性磷(AP)標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACSL6 Antibody補體成分4b(C4b)
桔青霉FITC標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACSL6 Antibody補體成分4(C4)
原鈣粘蛋白β11抗體調料葡萄球菌大鼠關節軟骨組織提取物
蛋白調解因子8抗體法氏檸檬桿菌大鼠滑膜組織提取物
蛋白體PSMα5抗體發酵乳桿菌大鼠骨骼肌組織提取物
神經叢蛋白A4抗體抗輻射不動桿菌大鼠成骨組織提取物
TGF-β1抑制劑(Disitertide)灰褐鏈霉 Chlorantholide D
卡氏黃褐桿 Cephalocyclidin A
枯草芽孢桿枯草亞種 Calyciphylline A
鏈霉 Angustin B
亮白曲霉 Angustin A
芬萊氏鏈霉 Acantrifoic acid A
寡雄腐霉 8-Geranyloxy-5,7-dimethoxycoumar
化物檢測試劑包 7,4'-Dihydroxy-3'-prenylflavan
短桿屬 6-Acetonyl-N-methyl-dihydrodecar
布魯氏 生物Ⅱ型 6,7-二羥薄荷
河道紅冬孢鎖擲孢酵母 3α-Acetoxy-20-oxo -29-norlupane-
乳粉 霉和酵母計數 3-Hydroxysarpagine
小孔異擔子* 3-Hydroxy-4,15-dinor-1(5)-xanthe
嗜熱類芽孢桿 1-Hydroxy-1-(4-hydroxy-2-methoxy
鮑姆木層孔 19(S)-Hydroxyconopharyngine