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詳細介紹
商品介紹：
WST-1 是廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑。WST-1 是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT 類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。 首先，MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan 不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan 都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-1產(chǎn)生的formazan 比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan 更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS 更加穩(wěn)定，使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外，WST-1和MTT、XTT等相比，線性范圍更寬，靈敏度更高。可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測，也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測，或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測等。WST-1 使用時無須同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞，也不必采用額外步驟去溶解formazan。WST-1對細胞無明顯毒性。加入WST-1 顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀板，使檢測時間更加靈活，便于找到佳測定時間。 儲存條件：2-8℃避光保存。 注意： 1．WST-1短期存放于2-8℃，長期存放請分裝后-20℃避光保存。 2．避免反復凍融。 3．凍存后溶解時注意重新混勻。 有效期：一年。 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：250T|500T|1000T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Drospirenone（標準品）英文名稱： Tigecycline整合αM/巨噬表面分子抗體包裝10g
Dutasteride(標準品)英文名稱： Tigecycline血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體包裝50g
Epinephrine hydrochloride(標...英文名稱： Tilmicosin血小板內(nèi)皮黏附分子1抗體包裝1g
Estradiol Benzoate（標準品）英文名稱： TilmicosinCD34抗體包裝25MG
Estradiol Cypionate(標準品)英文名稱： Timolol MaleateCD36抗體包裝100ml
Estradiol Enanthate(標準品)英文名稱： Timolol Maleate凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝25ml
Estradiol Valeate(標準品)英文名稱： Tinidazole凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體包裝5g
Estriol(標準品)英文名稱： Tinidazole凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝25g
Estrone（標準品）英文名稱： Tobramycin Base4號染色體開放閱讀框34抗體包裝5g
Ethiny Estradiol(標準品)英文名稱： Tobramycin Base酪蛋白激1γ3/CKI γ3抗體包裝25g
Ethisterone(標準品)英文名稱： Tobramycin Sulfate凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體包裝5g
Etoposide（標準品）英文名稱： Tobramycin Sulfate膽固氧化抗體包裝250mg
Fasudil hydrochloride(標準品)英文名稱： Tolnaftate半胱蛋白蛋白14抗體包裝1g
Fenofibrate（標準品）英文名稱： Topotecan HCl半胱蛋白蛋白5抗體包裝5g
Fenofibric acid(標準品)英文名稱： Topotecan HCl豬瘟病抗體包裝1g
: Z332資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR血栓A2試劑盒g(shù)薟精;Darutigenol
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品血栓前體蛋白試劑盒β-細辛腦;β-Asarone
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格：≥99.0% ,合物血清淀粉樣蛋白P試劑盒a-細辛;a-Asarone
WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒土庫曼鹽土生古 7-溴-1-氯異喹啉半胱氨酸蛋白3Elisa
皺孢鏈霉 4-嗎啉基芐S轉(zhuǎn)移π1Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 2-乙酰基-5-溴吡啶S轉(zhuǎn)移π1Elisa
釀酒酵母 3--4-硝基茴香蛋白激RElisa
發(fā)酵乳桿 2-氯-4-甲可溶性EPO受體Elisa
德沃斯氏 3-氯-4-甲肝臟甘油三脂脂肪Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-2-氟苯磺酰結(jié)核分枝桿Elisa
產(chǎn)色鏈霉 3-基-4-氟苯酸膜聯(lián)蛋白-A3Elisa
大腸埃希氏桿 3-氨基-2-甲基酸水合物1-羥基芘Elisa
解淀粉芽孢桿 2-氨基-3-基-4,5-二甲基吡咯乙酰肝硫酸鹽Elisa
小鏈霉 氯酞酸血管內(nèi)皮生長因子抗體Elisa
米根霉 2-(十八氧基)乙梅螺旋體IgM抗體Elisa
大腸埃希 2-氨基-3-基-4,5-二甲基吡咯梅螺旋體Igg抗體Elisa
芽孢桿 氯酞酸信號傳導子及轉(zhuǎn)錄激活子5Elisa
草色串孢 2-(十八氧基)乙磷酸化信號傳導子及轉(zhuǎn)錄激活子5Elisa
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