產(chǎn)品屬性:
中文名稱:蛋白質(zhì)酪氨酸激酶Syk抑制劑(Piceatannol)
英文名稱:Piceatannol
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Piceatannol是蛋白質(zhì)酪氨酸激酶Syk的選擇性抑制劑,它能夠抑制ICa,L,Ito,IKr,Ca2+轉(zhuǎn)移和除了IK1的Na+-Ca2+交換。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):10083-24-6 別名:Astringenin;trans-Piceatannol 純度:99.49% 分子量:244.24 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
腸桿菌屬鋅指蛋白471抗體Anti-MXD1 Antibody平滑肌肌動(dòng)蛋白γ2(ACTγ2)
竹喙球菌γ-基丁A受體相關(guān)膜蛋白3Anti-MYBL1 Antibody平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(ACTα2)
弧菌鋅指蛋白909抗體Anti-MYBL2 Antibody平滑肌蛋白3(LMOD3)
抗生鏈霉菌鋅指蛋白420抗體Anti-MYC Antibody平滑肌蛋白2(LMOD2)
生黃色鏈霉菌周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體Anti-MYBPC3 Antibody平滑肌蛋白1(LMOD1)
米曲霉鋅指蛋白318抗體Anti-MYD88 Antibody嘌呤能受體P2Y12(P2RY12)
鮑姆桑黃鋅指蛋白281抗體Anti-MYC Antibody嘌呤能受體P2X7(P2RX7)
平臍蠕孢菌鋅指蛋白274抗體Anti-MYD88 Antibody嘌呤霉敏感性肽(PSA)
亮白曲霉鋅指蛋白81抗體Anti-MYF5 Antibody皮質(zhì)3(CTXN3)
羅爾夫青霉鋅指蛋白148抗體Anti-MYD88 Antibody(PB0158)皮質(zhì)2(CTXN2)
扣囊復(fù)膜孢酵母鋅指蛋白342抗體Anti-MYD88 Antibody皮質(zhì)1(CTXN1)
擬棒形節(jié)叢孢鋅指蛋白350/癌易感基因1結(jié)合蛋白抗體Anti-MYLK Antibody皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)
柱隔孢菌鋅指蛋白263抗體Anti-N Cadherin/CDH2 Antibody皮質(zhì)結(jié)合球蛋白(CBG)
克魯斯假絲酵母鋅指蛋白195抗體Anti-NAB2 Antibody皮屑蛋白樣蛋白1(LEPREL1)
大腸埃希氏桿菌鋅指蛋白266抗體Anti-N WASP/WASL Antibody皮卡丘(Pikachurin)
樟疫霉鋅指蛋白786抗體Anti-NAA15 Antibody皮膚衍生肽抑制因子3(PI3)
嗅球蛋白1抗體頭葡萄球菌解脲亞種原代細(xì)胞提取物
含氧轉(zhuǎn)移1抗體木賊鐮孢人小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物
胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白190抗體N端Amycolatopsisdecaplanina人食管上皮細(xì)胞提取物
有機(jī)溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白OSTβ抗體Amycolatopsiskeratiniphilasubsp.keratiniphila人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞提取物
蛋白質(zhì)酪氨酸激酶Syk抑制劑(Piceatannol)大腸埃希氏 鈉晚期糖基化終末產(chǎn)物Elisa
彎孢 硫酸銨非酯化脂肪酸Elisa
微紫青霉 磷酸三苯酯胃蛋白Elisa
粉紅單端孢 4-叔丁基茴香碳酸酐Elisa
大豆慢生根瘤 磷酸酯17β-羥基甾體脫氫1Elisa
Albidiferax 磷酸三乙酯Ⅱ型膠原Elisa
海床游動(dòng)微 亞磷酸三丁酯I型膠原蛋白抗體Elisa
黑葡萄穗霉 DL-苯氨酸己烯雌酚Elisa
聚生殼 酸三正丁酯胱硫β-合成Elisa
大腸埃希氏 DL-色氨酸蛋氨酸合Elisa
普通紅色桿 肉豆蔻酸異酯甜菜堿同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移Elisa
喜土毛束霉 油酸甘油酯乙酰酯Elisa
芽植單胞屬 三乙酸甘油酯S轉(zhuǎn)移Elisa
地羅河桿 DL-纈氨酸C反應(yīng)蛋白Elisa
香菇 油酸乙酯造血器官壞死病Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)