詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GSK2838232 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
GSK2838232抑制HIV逆轉錄酶活性,詳細信息請參考文獻WO/2013090664A1中的化合物51。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1443460-91-0 分子量:809.56 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
橘葉(標準品)英文名稱: GinsenosideRg5層粘蛋白α3抗體包裝1g
巨大戟(標準品)英文名稱: CG溶體相關膜蛋白1抗體包裝250mg
具棲冬青苷(標準品)英文名稱: AMMoniuM MagnesiuM chloride羧肽抑制劑抗體包裝1g
瞿麥(標準品)英文名稱: Chebulinic acid卵磷酯膽固酰基轉移抗體包裝1g
卷柏(墊狀卷柏)(標準品)英文名稱: Chebulagic acid脂蛋白脂抗體包裝25g
卷柏(卷柏)(標準品)英文名稱: Tigogenin瘦受體抗體包裝5g
決明蒽醌;美決明子(標準品)英文名稱: Wedelolactone低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體包裝1g
決明子(標準品)英文名稱: Sinensetin磷化低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體包裝5g
決明子(小決明)(標準品)英文名稱: Chelidonine磷化腫瘤抑制基因LATS1抗體包裝25g
爵床(標準品)英文名稱: Cucurbitacin D富亮重復激2抗體包裝5g
咖啡乙酯(標準品)英文名稱: Anemoside A3肺耐藥相關蛋白抗體包裝100g
卡瓦胡椒A英文名稱: Scabioside C富含亮重復家庭蛋白3抗體包裝25g
卡瓦胡椒B英文名稱: V富含亮重復蛋白10抗體包裝5g
堪非-3-O-桑布雙糖苷英文名稱: Hederacolchiside A1富含亮重復家庭蛋白2抗體包裝1g
柯里拉京(標準品)英文名稱: Kalopanaxsaponin H富含亮重復死亡結構域蛋白抗體包裝250mg
安徽黃桿菌Flavobacterium│anhuiense 質量規格:>98%,標準品抗凝血抗體試劑盒番瀉苷元B;Sennidin B
可可鏈霉菌阿索變種Streptomyces│cacaoi var.asoensis 質量規格:Enzyme activity>330萬抗凝血-磷脂酰絲復合物試劑盒番瀉苷元A;Sennidin A
克魯斯假絲酵母Candida│krusei 質量規格:>99%抗凝血III試劑盒扶桑甾;beta-rosasterol
HIV逆轉錄酶抑制劑(GSK2838232)粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體訶子林鞣(標準品) Fuberidazole
生長抑制蛋白26/前列腺特異性膜抗原樣蛋白抗體訶子鞣質,訶子鞣 Florasulam
母瘤因X染色體蛋白抗體合歡花(標準品) Glyphosine
磷化Fas死亡結構域相關蛋白抗體合歡皮(標準品) Hexaflumuron
母瘤X蛋白抗體何首烏(標準品) Hexazinone
α-L巖藻糖苷抗體和厚樸酚(標準品) Halosulfuron-methyl
FbxW2蛋白抗體荷葉(標準品) Hexythiazox
Fbxw7蛋白抗體荷葉(標準品) Haloxyfop
FBXW8蛋白抗體鶴慶五味子癸 Imidacloprid