詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:Y16
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
Y16是G蛋白歐聯Rho GEFs抑制劑,能協同并增強Rhosin對RhoA的抑制活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:429653-73-6 純度:98.14% 分子量:384.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
血桿菌人吡啶交聯物Anti-ZNF436 Antibody小鼠磷脂酰絲(PS)
雞腿173人骨橋Anti-ZNF541 Antibody小鼠磷甘油酯(PC/CPG)
豌豆根瘤菌人γ基丁Anti-ZNF498 Antibody小鼠磷甘油酯(PC/CPG)
魯氏接合酵母人P物質受體Anti-ZNF460 Antibody小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)
叢毛單胞菌人環磷鳥苷Anti-ZNF575 Antibody小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)
總狀共頭霉人脂蛋白磷脂A2Anti-ZNF592 Antibody小鼠神經絲蛋白(NF)
釀酒酵母人內皮脂肪Anti-ZNF668 Antibody小鼠神經絲蛋白(NF)
葡萄盤孢人橫紋肌輔肌動蛋白αAnti-ZNF608 Antibody小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)
淡紫擬青霉人骨成型蛋白7Anti-ZNF638 Antibody小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)
枯草芽孢桿菌枯草亞種人25羥基維生D3Anti-ZNF596 Antibody小鼠絲/蘇蛋白磷(STK)
曲霉人白三烯B4Anti-ZNF682 Antibody小鼠絲/蘇蛋白磷(STK)
葡萄汁有孢漢遜酵母人腸脂肪結合蛋白Anti-ZNF691 Antibody小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)
釀酒酵母人氧化低密度脂蛋白Anti-ZNF682 Antibody小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)
栗疫菌人骨髓抑制因子1Anti-ZNF695 Antibody小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)
鏈球菌(不定種)人脂聯Anti-ZNF7 Antibody小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)
華麗黃鏈霉菌人組Anti-ZNF75 Antibody小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
囊泡相關膜蛋白2抗體扇形小孔菌人皮下脂肪細胞
01群小川型霍亂弧菌抗體亞粘團串珠鐮孢人類粒細胞系
鳥苷轉換因子VAV1抗體土生寬鐮孢霉恒河猴腎細胞
囊泡相關膜蛋白3抗體松口蘑(斜面)人漿細胞白血病細胞
G蛋白偶聯Rho GEFs抑制劑(Y16)血紅鞘氨單胞 4,4-雙(二甲氨基)硫代二苯甲酮
費氏中華根瘤 四丁基硫酸氫
隆德假單胞 蒽酮
炭黑曲霉 茚三酮
弗雷德里克斯堡假單胞 4-(4-偶氮)-1-萘
旋毛殼 乙二縮雙(鄰氨基)
哈茨木霉 2-萘
日本外擔 1-萘
黃曲霉 4--1-萘
豬丹絲 化血紅
果蔬汁 山梨酸、 氨三乙酸
球孢白僵 2,4,6-三溴-3-羥基
嗜芽孢桿 3,5-二-2-羥基苯磺酸鈉
貝氏葡萄座腔 天青石藍
山丘鏈霉 2,2′-聯氨-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二鹽