產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PI3K alpha抑制劑(CNX-1351)
英文名稱:CNX-1351
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
CNX-1351是PI3K_alpha_高效選擇性抑制劑,IC50值為6.8nM,對其他PI3K亞型作用弱20-400倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1276105-89-5 純度:99.44% 分子量:573.71 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
金針菇(F4-11)人膠原吡啶交聯(lián)Anti-YWHAE Antibody小鼠白血病抑制因子(LIF)
平菇人葡萄球菌蛋白AAnti-YWHAB Antibody小鼠巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)
皺褶假絲酵母人刀豆AAnti-YWHAE Antibody小鼠巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)
苜蓿莖點霉人游離原卟啉Anti-YWHAG Antibody小鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)
秀珍菇人脂多糖結(jié)合蛋白Anti-YWHAH Antibody小鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)
米曲霉疏展變種人過氧化Anti-ZADH2 Antibody小鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
黃桿菌人Anti-YWHAQ Antibody小鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
聚生殼菌人17-類固Anti-ZAR1 Antibody小鼠煙酰腺二核苷磷(NADPH)
根瘤菌人17羥皮質(zhì)類固Anti-ZAP70 Antibody小鼠煙酰腺二核苷磷(NADPH)
枯草芽孢桿菌人組織蛋白KAnti-ZADH2 Antibody小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)
Acinetobacter calcoacetias人骨形成蛋白Anti-ZBTB21 Antibody小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)
乳桿菌屬人視黃結(jié)合蛋白4Anti-ZBTB40 Antibody小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)
施氏假單胞菌人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體Anti-ZBTB40 Antibody小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)
蠟狀芽孢桿菌人垂草扁桃Anti-ZBTB45 Antibody小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)
pGR107人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白Anti-ZC3H11A Antibody小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)
黃薄芝人血凝Anti-ZC3H13 Antibody小鼠磷脂酰絲(PS)
囊泡相關(guān)膜蛋白8抗體暗褶扇菇小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞
視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX1抗體擬莖點霉菌倉鼠卵巢細(xì)胞亞株
視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體柱枝雙孢霉人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293)
液泡分選蛋白4抗體維吉尼亞鏈霉菌人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞
PI3K alpha抑制劑(CNX-1351)釀酒酵母 柯伊-7-O-葡萄糖苷
糖多孢屬 汽巴蘭F3GA
偏腫栓 柯諾辛B
球孢白僵 鉻天青S
漢遜德巴酵母 柯諾辛
草地阿格蕾氏 鈣指示劑
黑曲霉 奎寧
乳微桿 鉍試劑Ⅰ
枯草芽孢桿 苦馬豆
側(cè)耳 8-苯-1-萘磺酸
米曲霉 酸性鉻藍(lán)K
枯草芽孢桿 開環(huán)異落葉松樹脂
大腸桿 核固紅
地星 比多巴
針葉樹散斑殼 1-萘
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)