詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Mogrol | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Mogrol是羅漢果甜甙的生物代謝物,能夠抑制ERK1/2和STAT3的信號通路,同時能降低CREB的活性,活化AMPK。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:88930-15-8 純度:98.06% 分子量:476.73 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
枯草芽孢桿菌大鼠網膜Anti-OR2F2 Antibody人肽酰脯酰異構(親環蛋白)樣1(PPIL1)
意外鏈霉菌人單核趨化蛋白1Anti-OR2G2 Antibody人肽酰脯酰異構(親環蛋白)樣1(PPIL1)
羅伊氏乳桿菌小鼠轉/谷轉Anti-OR2D2 Antibody人肽酰脯酰異構(親環蛋白)樣1(PPIL1)
釀酒酵母人L選擇Anti-OR2G3 Antibody人肽酰脯酰異構(親環蛋白)樣1(PPIL1)
毛霉屬小鼠骨形成蛋白Anti-OR2H2 Antibody人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3(MAPKAPK3)
大腸埃希菌大鼠孤腓肽Anti-OR2I1P Antibody人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3(MAPKAPK3)
球孢白僵菌小鼠視黃結合蛋白4Anti-OR2J3 Antibody人血管緊張Ⅰ轉化(ACEⅠ)
樟疫霉人白介9Anti-OR2J2 Antibody人血管緊張Ⅰ轉化(ACEⅠ)
E.coli EPI400大鼠蛋白磷Anti-OR2K2 Antibody人抑肽(AP)
產腸大腸埃希氏菌大鼠硫氧還蛋白還原Anti-OR2L5 Antibody人抑肽(AP)
白淺灰鏈霉菌人白介8Anti-OR2M3 Antibody人胱天蛋白12(Casp-12)
中國漢納酵母小鼠6前列腺F1aAnti-OR2M7 Antibody人胱天蛋白12(Casp-12)
樟疫霉人白介6Anti-OR2M2 Antibody人胱天蛋白12(Casp-12)
黃桿菌大鼠硫氧化還原蛋白Anti-OR2T1 Antibody人胱天蛋白12(Casp-12)
枯草芽孢桿菌小鼠戊糖Anti-OR2T10 Antibody人蛋白激A(PKA)
廣布擬盤多毛孢大鼠膠原IIAnti-OR2T2 Antibody人蛋白激A(PKA)
環指蛋白32抗體#雙輪絲鏈霉菌小鼠腎臟內髓集合管3上皮細胞
RNA結合蛋白26抗體#草菇乳乳球菌組成型表達質粒
Nogo66受體相關蛋白3抗體#天藍色鏈霉菌McCoy s 5A基礎培養基:
RNA尿苷合結構域蛋白2抗體花生生莖點霉兔紅細胞6%
ERK1/2和STAT3信號通路抑制劑(Mogrol)大腸埃希 5,7-Diacetoxy-3,4',8-trimethoxyf
紫色鏈霉 3-Phenyl-1-(pyrrol-1-yl)propan-1
金黃回旋鏈霉 3,5-Diprenyl-4-hydroxybenzaldehy
空腸彎曲桿 3,4-Dimethoxycinnamyl alcohol
乙型副傷寒沙門氏 3,4-Dihydroxycinnamamide
假單胞屬 21-表千層塔烯二
樹舌靈芝 2,6-二甲氧基-1-乙酰甲基
古巴栓孔 2,4,6,6-四甲基-3(6H)-吡啶酮
葡萄座腔 2,2,5,5-四甲基環己烷-1,
木克酵母屬 1-甲氧基羰基-beta-咔啉
水桿 (+)-N-Methylallosedridine
克勞氏芽孢桿 (-)-白花前胡乙
亞螺毛殼 (-)-白花前胡甲
盤長孢狀盤孢 檉柳黃
羊無漿體(寧縣盤克株) 華良姜