多靶點酪氨酸激酶抑制劑(XL-647)公司正在出售的產(chǎn)品：ACH(Mouse acetylcholine) ELISA Kit 小鼠酰膽鹽萘二 ACS, >98%
LTB4(Mouse Leukotriene B4) ELISA Kit 小鼠白三烯B4硝 AR
LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

香菇Cy5.5標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIL1 Antibody(PB0481)蛋白激Bα(PKBα)

噬瓊膠海水菌Cy7標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIM Antibody(PB0378)蛋白二硫鍵異構(gòu)(PDI)

野葛頭孢霉PE標記的兔抗小鼠IgMAnti-VEGFD Antibody(PB0952)蛋白二硫化物異構(gòu)A6(PDIA6)

黃發(fā)鏈霉菌Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgMAnti-VGF Antibody蛋白二硫化物異構(gòu)A5(PDIA5)

熱紅短芽胞桿菌APC標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIP Antibody蛋白二硫化物異構(gòu)A4(PDIA4)

騷動厄氏菌膠體金標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIP Antibody蛋白二硫化物異構(gòu)A2(PDIA2)

枯草芽孢桿菌Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIPR1 Antibody蛋白Z依賴性蛋白抑制因子(ZPI)

淡紫紫霉Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠IgMAnti-VPS4B Antibody蛋白Z(PROZ)

綠蓋粉孢牛肝菌Cy3標記的兔抗小鼠IgMAnti-VRL1/TRPV2 Antibody蛋白S(PROS)

黑曲霉FITC標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIPR1 Antibody蛋白O-巖藻糖基轉(zhuǎn)移2(POFUT2)

多主葡萄殼菌羅丹明標記的兔抗小鼠IgMAnti-VNN1 Antibody蛋白O-巖藻糖基轉(zhuǎn)移1(POFUT1)

平臍儒孢菌羅丹明標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VPS4A Antibody蛋白O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移1(POGLUT1)

猴頭菌—50043復(fù)壯堿性磷（AP）標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VSX2 Antibody蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移2(POMT2)

甲酚斯魯夫酵母FITC標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VRK1 Antibody蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移1(POMT1)

產(chǎn)硫化物嗜鹽堿紅菌膠體金標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VTN Antibody蛋白L-異天冬-O-甲基轉(zhuǎn)移(PCMT1)

草青霉Cy3標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VTCN1 Antibody蛋白C抑制因子(PCI)

天門冬甲基轉(zhuǎn)移PCMT抗體生孢梭菌 小鼠尿道組織提取物

絲/蘇蛋白激39抗體發(fā)根根瘤菌小鼠腎足突基底膜組織提取物

端粒保護蛋白1抗體粉紅單端孢霉小鼠腎組織提取物

腦3抗體皺褶青霉小鼠腎小管組織提取物
多靶點酪氨酸激酶抑制劑(XL-647)根瘤 黃華堿

暗黑鏈霉 β,β-二甲基烯酰紫草

金龜子綠僵 葫蘆IIA

淡紫擬青霉 五加苷D

大腸埃希 醋酸己定

長枝木霉 去氫茯苓酸

蒙塔涅梨孢假殼 甲基紫精

 化血根堿

金針菇（毛柄、冬菇） 地弗地衣酸

太平洋萊茵海默氏 黃芪多糖

熊蜂生斯塔莫酵母 對氨基

紅冬孢酵母 多巴鹽酸鹽

釀酒酵母 青蒿琥酯

滑假絲酵母  去氫荷葉堿

嗜熱脂肪地芽孢桿 N-甲基荷葉堿