詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)
英文名稱:PD 151746
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
PD151746是鈣蛋白酶抑制劑,抑制u-calpain(Ki=0.26±0.03μM)選擇性比抑制m-calpain(Ki=5.33±0.77μM)高20倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:179461-52-0 分子量:237.25 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
磺加貝酯(標準品)英文名稱: Glimepiride鈣粘附蛋白8抗體包裝1g
磺羅(標準品)英文名稱: Griseofulvin;Fulcin6號染色體開放閱讀框174抗體包裝5g
磺帕珠沙星(標準品)英文名稱: Griseofulvin6號染色體開放閱讀框150抗體包裝25g
磺培沙星(標準品)英文名稱: Sodium hyaluronateX染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
磺齊拉西(標準品)英文名稱: Hydrocortisone9號染色體開放閱讀框152抗體包裝25g
磺伊馬替尼(標準品)英文名稱: Hydrocortisone6號染色體開放閱讀框58抗體包裝5g
基斑蝥(標準品)英文名稱: Ibutilide fumarate 接觸蛋白相關蛋白4抗體包裝1g
基丁香酚(標準品)英文名稱: Ibutilide fumarate CD24抗體包裝1g
基原薯蕷皂苷(標準品)英文名稱: Isepamicine Sulphate接觸蛋白相關蛋白3抗體包裝100g
硫二馬尼(標準品)英文名稱: BexaroteneCD24抗體包裝25g
硫新斯的明(標準品)英文名稱: Bexarotene限局性核因子3抗體包裝1g
巰咪唑(標準品)英文名稱: Ketoprofen胰羧肽A6抗體包裝250mg
巰咪唑(標準品)英文名稱: Ketoprofen9號染色體開放閱讀框150抗體包裝5g
硝唑(標準品)英文名稱: Ketotifen fumarate鈣粘附蛋白9抗體包裝1g
硝唑雜質A(2-基-5-硝基咪唑)標準品英文名稱: Ketotifen fumarate鈣粘蛋白15抗體包裝5g
: =AS3.951資源名稱: 米曲霉 質量規格:>99%,USP腺苷環化1試劑盒五味子乙;Schisandrin B
: 75-049資源名稱: 非O1群霍亂弧菌 質量規格:HPLC>98%,標準品腺苷三磷結合盒轉運體G2試劑盒土克甾;Turkesterone
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:>98%,USP32腺苷三磷結合盒轉運體A1試劑盒土貝母皂苷乙;TubeiMoside I
鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)硝唑偶聯血藍蛋白穿山龍(標準品)Human
三聚與雞卵白蛋白偶聯物穿心蓮(標準品)Human, Mouse
神經元特異性烯化抗原穿心蓮內酯(標準品)Human, Mouse, Rat
Nogo-66 (1-40)船形烏頭(標準品)Human
神經肽 Y(1-36)垂盆草(標準品)Human, Mouse, Rat
神經保護肽椿皮(標準品)Human
神經絲蛋白蛋白多肽慈溪麥冬皂苷AHuman
土霉偶聯牛血清白蛋白次野鳶尾黃(標準品)Human, Mouse
土霉偶聯雞卵白蛋白甘草查爾(標準品)Human, Mouse
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)