大鼠關(guān)節(jié)軟骨原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 NCI-H295R(人上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) NCI-H2087 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 1ml/T75 PANC-1, 人胰腺癌細(xì)胞 Human HBL-100 人整合 SV40基因的上皮細(xì)胞 大鼠原代外周血單個(gè)核細(xì)胞

大鼠關(guān)節(jié)軟骨原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分離自關(guān)節(jié)軟骨組織；關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨，表面光滑、呈淡藍(lán)色、有光澤，它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架，這種框架呈半環(huán)形，類似拱形球門，其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上，上端朝向關(guān)節(jié)面，這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會(huì)掉下來，同時(shí)當(dāng)受到壓力時(shí)候，還可以有少許的變形，起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間，散在分布著軟骨細(xì)胞，軟骨細(xì)胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細(xì)胞組成，這些軟骨細(xì)胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配，也沒有血管，其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得，而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中，關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)，使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行，所以關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層，單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形、染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)，這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞采用膠原酶聯(lián)合蛋白酶消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞  CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細(xì)胞裂解液   人正常肝細(xì)胞;L-02  R 1610倉鼠肺細(xì)胞 R 1610 hamster lung cells DMEM+10%FBS  PA319   人大腸癌細(xì)胞 小鼠原代腸道干細(xì)胞 兔原代心房心肌細(xì)胞

Gentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白

EPCAM重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白  Protein

ECM1 Protein Mouse 重組小鼠 ECM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SPEG重組人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠細(xì)胞色素P450家族成員11B1(CYP11B1)試劑盒 ，英文名： CYP11B1 ELISA Kit

Mouse adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 小鼠能a1A受體(ADRA1A)試劑盒

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHSP-70ELISAKit大鼠熱休克蛋白70

細(xì)胞KUNEL測定試劑盒10次

ELISAKitIL1Ra大鼠白介素1受體拮抗劑

兔白介素17(IL-17)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔乙酰(ACh)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔去甲上腺素(NA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

   ELISA.   96T/48T

大鼠關(guān)節(jié)軟骨原代細(xì)胞小鼠過氧化酶(GSH-Px)試劑盒 96T/48T

Human retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 人結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒

Humanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASA試劑盒人抗骨骼肌抗體(ASA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒10次

Humanueinsulin,TIELISAKit人真胰島素(TI)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD302重組小鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白  Protein

S100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A13 (S100A13)

CALR重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FGFR3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR3 蛋白

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。