詳細介紹
商品介紹:
EPZ015866(GSK591)是PRMT5選擇性抑制劑,和EPZ015666相比,EPZ015866有更強的對PMT酶的抑制作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1616391-87-7 別名:GSK591;GSK3203591 純度:98.71% 分子量:380.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:PRMT5抑制劑(GSK591)
英文名稱:EPZ015866
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母TSK蛋白抗體Anti-GSDMD Antibody絨毛蛋白(CVL)
楊生毛栓菌味覺受體蛋白家族2亞基5抗體Anti-GSK3B(GSK3β) Antibody球蛋白(CYGB)
大腸埃希氏菌微管蛋白聚合促進蛋白24Anti-GSN Antibody角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)
釀酒酵母腱糖蛋白R抗體Anti-GSN Antibody(PB0198)間粘附分子5(ICAM5)
擬青霉瞬時受體電位蛋白12抗體Anti-GSN Antibody間粘附分子4(ICAM4)
葡萄座腔菌屬結構蛋白家族2抗體Anti-GSR Antibody間粘附分子3(ICAM3)
黑附球菌先心病相關蛋白TBX1抗體Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody間粘附分子2(ICAM2)
側孢短芽孢桿菌血管生成受體2抗體Anti-GSR Antibody間粘附分子1(ICAM1)
總狀共頭霉端粒調控因子抗體Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody胱硫γ裂解(CSE)
Lysinibacillus微管蛋白抗體(免疫組化用抗體)TubulinβAnti-GSR Antibody附著蛋白相互作用蛋白(CYTIP)
硬結桿菌微管蛋白抗體(免疫組化用抗體)Tubulin βAnti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody附著蛋白4(CYTH4)
異常威克漢姆酵母酪羥化抗體Anti-Gsta3 Antibody附著蛋白3(CYTH3)
空腸彎曲桿菌酪抗體Anti-GSTM1 Antibody附著蛋白2(CYTH2)
高山被孢霉胸腺β10抗體Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody附著蛋白1(CYTH1)
紫色紅曲粘附分子1抗體Anti-GSTM3 Antibody分裂周期因子25(CDC25)
pLVX Tre3G胸腺基質淋巴生成-1抗體(人)Anti-GSTP1 Antibody分裂周期因子23(CDC23)
腫瘤壞死因子α誘導蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4抗體卡氏黃褐桿菌人膀胱成纖維細胞
絲/蘇蛋白激31抗體普通變形菌人腎足突細胞
5-羥色胺受體2C抗體鈍齒棒桿菌人腎動脈內皮細胞
分泌模塊化鈣結合蛋白2抗體平滑肌相關蛋白2枯草芽孢桿菌斯氏亞種人腎系膜細胞
PRMT5抑制劑(GSK591)半裸法氏殼 鋱/Tb凝血原片段F1+2Elisa
間型彎孢 二乙烯苯凝血抗凝血復合物Elisa
杰丁畢赤酵母 釓/Gd補體片斷5aElisa
淡紫擬青霉 銪/Eu血小板第四因子Elisa
猴頭 二乙烯苯β血小板球蛋白;β血栓環蛋白Elisa
蘇云金芽孢桿 釤/Sm多形核白彈性蛋白Elisa
大孢滑銹傘 二酸二異酯苯氨酸氫化Elisa
黃桿 釹/Nd苯氨酸氫化Elisa
施氏假單胞 鐠/Pr甘油一酯Elisa
蕈狀芽孢桿 4-氟-2-甲苯甘油二酯Elisa
密歇根棍狀桿標記亞種 鈰/Ce血纖肽;纖維蛋白肽AElisa
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 鑭/La促性腺釋放抗體Elisa
串珠鐮孢 (R,R)-(+)-2,2'-異亞基雙(4-叔丁基-2-惡唑啉)補體蛋白8Elisa
白酒紅鏈霉 硫/S一氧化氮合成Elisa
大腸埃希 2,2'-二羥基-4-甲氧基二苯甲酮色C氧化Elisa