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動物細(xì)胞組織培養(yǎng)中常見的問題及解決方法

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1.培養(yǎng)試劑的保存:
   血清:-5oC - -20oC 保存,避免反復(fù)凍融。
   培養(yǎng)基:  2oC – 8oC避光保存。
   *培養(yǎng)基: 2oC – 8oC避光保存,并在2周內(nèi)用完。
   盡量縮短血清和培養(yǎng)基見光的時間 
2.培養(yǎng)基中是否應(yīng)加酚紅:
   酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑,中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,特別是雌激素。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞尤其是哺乳類細(xì)胞時,應(yīng)使用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時不使用加酚紅的培養(yǎng)基。
3.液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺使用方法:
   很多細(xì)胞生長要求在培養(yǎng)液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置于-20?C冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4?C 冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。替代L-谷氨酰胺。Glutaplex與L-谷氨酰胺相比更加穩(wěn)定,降解比較慢,提高細(xì)胞的存活和生長,極大降低對細(xì)胞有毒性的氨的積累。

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