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丙酸蛛網(wǎng)菌PCR檢測試劑盒PCR實(shí)驗(yàn)步驟

閱讀:91          發(fā)布時間:2020-5-19

丙酸蛛網(wǎng)菌PCR檢測試劑盒PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

典型的PCR由

(1)高溫變性模板;

(2)引物與模板退火;

(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:

將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;

人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;

耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。

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