羊原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 PTPN12 Others Human 人 PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 IZUMO1 Others Human 人 IZUMO1 人細(xì)胞裂解液 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 人原代胃成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代股動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

羊原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌、無(wú)污染，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè)。

松弛肽(RLN)重組蛋白 Recombinant Relaxin (RLN)

ACBD6 Protein Human 重組人 ACBD6 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL1A重組人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NCAM2重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)試劑盒 ，英文名： SFRP4 ELISA Kit

Rat betacellulin (BTC) ELISA Kit 大鼠β細(xì)胞素(BTC)試劑盒

Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforDPPIVELISAKit大鼠二肽基肽酶Ⅳ

細(xì)胞葡萄糖激酶(glucosekinase)比色法定量試劑盒20次

Rathepaticlipase,HLELISAKit大鼠肝脂酶(HL)試劑盒

勻漿制作或抽提   Homogenate production or exaction

（皮膚骨骼肌腸肌肉等難勻特殊樣品）   (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)

超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè)   Superoxide dismase (SOD) detection

二（MDA）檢測(cè)   Malondialdehyde (MDA) detection

植物(ETH)ELISA 試劑盒

Human ai parainfluenza virus IgM aibody (ai-PIV IgM) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgM抗體(ai-PIV IgM)試劑盒

PorcineImmunoglobulinG,IgGELISAKit 豬免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAFUELISAKit大鼠αL巖藻糖苷酶

血液唾液酸(SA)比色法定量試劑盒50次

MouseThyroid-Peroxidase,TPOELISAKit小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)試劑盒

PE-Cy5標(biāo)記人CD57單克隆抗體

G蛋白偶聯(lián)受體171抗體

羊原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基IL1A重組人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白 Protein

松弛肽(RLN)重組蛋白 Recombinant Relaxin (RLN)

NCAM2重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACBD6 Protein Human 重組人 ACBD6 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)