詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠三叉神經元細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1409 |
商品介紹:
名稱 大鼠三叉神經元細胞 2.組織來源:三叉神經組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠三叉神經元細胞分離自三叉神經組織;三叉神經為最粗大的混合性腦神經,含一般軀體感覺和特殊內臟運動兩種纖維。其特殊內臟運動纖維起于腦橋中段的三叉神經運動核,纖維組成三叉神經運動根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺根下內側,最后進入三叉神經第3支下頜神經中,經卵圓孔出顱,隨下頜神經分支分布于咀嚼肌等。運動根內還含有三叉神經中腦核有關的纖維,主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉神經內以軀體感覺神經纖維為主,這些纖維的細胞體位于三叉神經節(半月節)內,該神經節位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經節由假單極神經元組成,其中樞突集中構成了粗大的三叉神經感覺根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦,止于三叉神經諸感覺核,其中傳導痛溫覺的纖維主要終止于三叉神經脊束核;傳導觸覺的纖維主要終止于三叉神經腦橋核。三叉神經節細胞的周圍突組成三叉神經三大分支,即第1支眼神經、第2支上頜神經、第3支為下頜神經。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等,傳導痛、溫、觸等多種感覺。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠三叉神經元細胞采用胰蛋白酶消化法結合神經元專用培養基培養、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠三叉神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml) 培養基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R314 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態神經元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL1R1 / CD121a 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H3N2 (A/Babol/36/2005) 神經 (Neuraminidase/NA) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 OSMR / IL-31RB 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ULBP2 / N2DL-2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠三叉神經元細胞聯氨 CP,98.0%氯化 分析標準品,99.98%M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit 小鼠胚胎干系MESPU30
聯氨 99.99% metals basis氯化 分析標準品,K(99.97%)/Cl(100.00%)NF-κB p65(Mouse nuclear factor-κB p65) ELISA Kit 小鼠核因子κB亞基p65親和肽
鹽酸 ACS, 37% fuming, Hg ≤0.0000005%, ≥37% (T)重鉻酸 分析標準品,99.998%GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse plaet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa
鹽酸 GR,36-38%重鉻酸標準溶液0.1mol/LFFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit 小鼠游離脂肪酸
鹽酸 用于痕量分析, ≥37% (T)鄰苯二甲酸氫 核磁共振定量標準,99.998%TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反應蛋白/敏感蛋白1
鹽酸 ACS, 37%高錳酸標準溶液1/5KMnO4:0.1011mol/LON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘連蛋白
鹽酸 電子級,37%標準溶液 1.00mg/mL,基體:甲(劇品)FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit 小鼠
鹽酸標準溶液 1.000mol/L(1N)環唑標準溶液 1.00mg/mlhiston-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2bx