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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 大鼠脾淋巴細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1217 |
商品介紹：
名稱 大鼠脾淋巴細胞 2.組織來源：脾臟 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠脾淋巴細胞分離自脾臟組織；脾臟是機體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，是機體細胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區后外方肋弓深處，與9－11肋相對，長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃，后方與左腎、左腎上腺毗鄰，下端與結腸脾溝相鄰，地柔軟的網狀內皮細胞器官。淋巴細胞（lymphocyte）白細胞的一種，由淋巴器官產生，機體免疫應答功能的重要細胞成分。淋巴器官根據其發生和功能的差異，可分為中樞淋巴器官（又名初級淋巴器官）和周圍淋巴器官（又名次級淋巴器官）兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當器官（有人認為在哺乳動物是骨髓）。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細胞，成熟后將其轉送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結等。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖，繼而發揮其免疫功能。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠脾淋巴細胞采用機械研磨法結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠脾淋巴細胞經過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R176 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細胞形態圓形 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
EPOR ELISA配對抗體
Ephrin-A1 / EFNA1 ELISA配對抗體
CEACAM5 / CD66e ELISA配對抗體
CD69 ELISA配對抗體
OSMR / IL-31RB ELISA配對抗體
小鼠 IL6RA / CD126 ELISA配對抗體
小鼠 CD157 / BST1 ELISA配對抗體
HSP27 / HSPB1 ELISA配對抗體
SerpinF2 ELISA配對抗體
小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 ELISA配對抗體
大鼠脾淋巴細胞Bacillus thuringiensis鸚鵡衣原體IgM檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis鸚鵡衣原體IgA檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis抗II檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis抗X檢測試劑盒
Bacillus thuringiensisβ抑制蛋白2檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis碳水化合物反應原件結合蛋白檢測試劑盒
Bacillus thuringiensisPCNP檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis腫瘤壞死因子α誘導蛋白8樣分子2檢測試劑盒
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