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RANKL elisa酶聯(lián)免疫試劑盒間接法
(1) 抗原包被：用包被液將PEDV抗原作1∶5稀釋包被反應(yīng)板，每孔100μl，同時(shí)設(shè)陰性細(xì)胞培養(yǎng)物對(duì)照孔，置4℃過(guò)夜。
(2) 洗滌：用洗滌液洗滌2次，每次2min，瀝干。
(3) 加入被檢血清：用保溫液將被檢血清作1∶100稀釋?zhuān)尤敕磻?yīng)板相鄰的兩個(gè)孔中，每孔100μl。同時(shí)作陰、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)血清對(duì)照，置37℃孵育1h。
(4) 洗滌3次：方法同上。
(5) 加入酶結(jié)合物：用保溫液將酶結(jié)合物作1∶4 000稀釋?zhuān)尤敕磻?yīng)孔中，每孔100μl，置37℃孵育1h。
(6) 洗滌3次：方法同上。
(7) 加入底物：每孔100μl，置室溫暗盒內(nèi)顯色20min。
(8) 加入終止液：每孔50μl，靜置5min。
(9) 測(cè)定OD值：用檢測(cè)儀，于492nm波長(zhǎng)，按儀器使用及制定標(biāo)準(zhǔn)要求調(diào)節(jié)儀器，測(cè)定各反應(yīng)孔的OD值，記錄結(jié)果。