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概述
檢測原理 多標記免疫熒光染色是基于抗原、抗體特異性結合的原理,選用辣根過氧化物酶(HRP)標記的二抗抗體,對試劑盒中的熒光染料進行活化,將信號共價結合到抗原上。借助于不同的熒光染料標記,通過多輪染色循環實現組織或細胞的原位多靶點染色。
產品組成
單色熒光染料-PPD520、單色熒光染料-PPD540、單色熒光染料-PPD570、單色熒光染料-PPD620、單色熒光染料-PPD650、單色熒光染料-PPD690、單色熒光染料-DAPI、信號放大反應液、鼠兔通用型HRP標記二抗、增強型抗淬滅封片劑。
檢測試劑及設備
1. 所需試劑:DMSO(abs9184)、滅菌去離子水(abs9259)、二甲苯、乙醇(*、95%、70%)、10%中性福爾馬林、抗原修復液、一抗封閉液、磷酸鹽緩沖液(10*PBS,abs961)等。
2. 檢測設備:熒光顯微鏡或熒光全片掃描設備,PPD系列熒光染料適用的激發和發射濾光片應符合下表中的建議。
熒光染料名 波長
激發 Excitation 發射 Emission
DAPI 360 461
PPD 520 490 520
PPD 540 520 540
PPD 570 550 570
PPD 620 590 620
PPD 650 640 660
PPD 690 660 690
應用 主要用于人源或小鼠組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫熒光染色。
使用方法
1. 熒光染料的稀釋:若染料為干粉,使用100ulDMSO溶解,制成100X染料母液;若染料為液態表示出廠即為DMSO溶解的100X母液;使用信號放大反應液按1:100稀釋制備染料工作液(現用現配);DAPI使用無菌水按1:100稀釋制備工作液。
2. 二抗的使用:試劑盒標配為鼠兔通用型二抗,適用人源樣本,不適用小鼠組織,實驗前請核實一抗種屬是否匹配。小鼠組織需換用其他類型的二抗。
性能
保存方法 熒光染料需避光保存,經DMSO溶解后2~8℃儲存,產品有效期為12個月。
產品性能指標
1. 符合性:取符合性組織片(包括陽性組織片和陰性試劑對照),經相應的免疫組化試驗后,陽性對照染色結果為陽性,陰性對照染色結果為陰性。
2. 批內重復性:取同一批次的試劑盒,檢測同一組織切片3片,染色結果應*。
注意事項
1. 本試劑盒只用于免疫組化,不做其他用途。
2. 本試劑盒*于專業人員使用。
3. 應采用適當的防護措施,以避免試劑同皮膚和眼睛接觸。
4. 超過有效期的試劑活性可能降低,因此不得使用超過有效期的試劑。
5. 若將本試劑盒的染色組分與其他公司的產品混合使用,在染色過程中可能出現異常情況。
6. 脫蠟不*,容易影響染色效果。
7. 為了防止可能出現的假陰性、假陽性結果,實驗過程中需有陽性對照及陰性對照同時進行。
8. 使用本試劑盒中所產生的各種廢棄物都應按照《醫療廢物管理條例》進行處理。