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多重免疫組化，主要的技術原理來自TSA技術，TSA即酪酰胺信號放大(Tyramide signal amplification)是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料Alexa Fluor®、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過氧化物酶反應(酪胺鹽在HRP催化H202下形成共價鍵結合位點)，產生大量的酶促產物，該產物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結合，這樣在抗原-抗體結合部位就有大量的生物素沉積，與隨后加入的Streptavidin—HRP/熒光基團結合，經幾次這樣的循環放大，可以結合大量的酶分子or熒光基團，結果使其檢測信號得到幾何級放大。

簡單來說，用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP（而不是直接偶聯熒光素），來催化后續添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯，使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。
然后微波處理，前一輪非共價結合的抗體被洗掉，共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復始。等到所有抗體孵育結束，熒光素都結合好后，最后去檢測結果。

講座主題：大咖來襲！多靶點組織多色與空間表型微環境解析

講座時間：12月5日（周二）15:00-16:00

講座內容：

1.多靶點組織多色與原位分析的技術原理與進展

2.多維度解析組織實驗設計與分析技巧

3.組織空間大數據信息分析方法與案例分享

特邀嘉賓：

李光超 博士  TissueGnostics (TG) 公司

中國科學院動物研究所畢業，具有多年顯微成像及病理學分析領域工作經驗，發表多篇SCI科研論文。著手打造專業的全景組織流式定量分析平

臺，在腫瘤免疫微環境、精準醫療和個體化治療等領域具有豐富經驗。