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關于重組蛋白,你真的了解它嗎?

閱讀:1110      發布時間:2024-6-19
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重組蛋白是指利用DNA重組技術或重組RNA技術從而獲得并生產的蛋白質。具體操作流程可以概括為利用中心法則采用基因重組分子克隆技術,獲得可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體,之后將其轉入可以表達目的蛋白的宿主細胞從而表達特定的重組蛋白分子。重組蛋白獲得的途徑分為體內和體外生產,表達系統主要分為原核表達系統和真核表達系統。原核表達系統最常見的是利用大腸桿菌進行表達,真核表達系統主要為酵母蛋白表達、哺乳動物細胞蛋白表達(常用的細胞為CHO細胞、HEK293細胞)、昆蟲細胞蛋白表達。

 

圖 重組蛋白四大表達系統

 

重組蛋白技術主要用于科學研究、生物制藥、疫苗開發以及診斷試劑研發等領域,能夠大量生產具有特定生物學活性、藥理活性或科研價值的蛋白質,例如細胞因子、激素、酶、抗體(包括單克隆抗體)、治療性蛋白以及其他功能性蛋白等。迄今為止,已有超過130種重組蛋白獲得美國FDA批準用于臨床,然而,世界有超過170種重組蛋白被生產和用于醫學。重組蛋白是有效的藥物,不會產生脫靶副作用,而且比小分子藥物的開發時間更短,克服了傳統提取方法產量低、純度難以控制的問題。現在所有大型制藥公司都將重組蛋白作為藥物來開發,經過30余年發展,重組蛋白藥物已成為現代生物制藥領域最重要的產品之一,占據生物藥市場三分之一以上的份額。根據Frost&Sullivan數據,在中國,重組蛋白生物科研試劑總體市場從2016年的5億元增長到2019年的9億元,期間年復合增長率為20.0%,預計2024年市場規模將達到19億元,2019年至2024年間年復合增長率為17.9%。盡管我國重組蛋白技術起步較晚,隨著國內技術水平的提升和市場競爭的加劇,國產替代的進程有望加快。

 

重組蛋白生產流程:

 

1)獲取cDNA并創建表達克隆:首先需要獲取目標蛋白質的cDNA序列,并將其克隆到表達載體中,以便于在宿主細胞中表達;

2)克隆:將含有目標蛋白基因的表達載體轉移到宿主細胞中;

3)在合適的系統中表達蛋白質:選擇合適的宿主細胞系統進行蛋白質的表達,表達系統可以是大腸桿菌、酵母、哺乳動物細胞等;

4)小規模試驗表達:在小規模條件下進行蛋白質的表達試驗,以確定表達條件和蛋白質的產量;

5)蛋白純化:通過各種層析技術,如離子交換層析、凝膠過濾層析、親和層析等,從宿主細胞的裂解物中純化出目標蛋白質;

6)質量控制:對純化后的蛋白質進行表征,包括其分子大小、純度、活性等;

7)擴大生產:如果需要大量重組蛋白,可以通過在生物反應器中培養轉化的宿主細胞來擴大生產過程。生物反應器為細胞生長和大規模重組蛋白生產提供了受控環境。

 

常見重組蛋白類型:

 

重組蛋白的類型包括治療蛋白、工業酶、診斷蛋白、研究工具、疫苗、生物材料、生物工程、生物傳感器和生物催化劑。已被廣泛應用于蛋白結構研究、免疫檢測試劑、重組蛋白藥物、診斷試劑開發、抗體藥物靶點、CAR-T 細胞治療靶點、Fc 受體、流感病毒蛋白和細胞因子等大多數熱門研究領域。下面給大家介紹比較熱門的重組蛋白。

 

1、白細胞介素(Interleukin, IL)

由多種細胞產生并作用于多種細胞的一類細胞因子。IL在傳遞信息,激活與調節免疫細胞,介導T、B細胞活化、增殖與分化及在炎癥反應中起重要作用,是淋巴因子(1ymphokins)家族中的成員,由淋巴細胞、巨噬細胞等產生。白細胞介素都是通過與靶細胞表面的細胞因子受體特異性結合來發揮其生物學效應,這些效應包括促進靶細胞的增殖和分Chemicalbook化,增強抗感染和殺傷腫瘤細胞效應,促進或抑制其他細胞因子合成,促進炎癥過程,影響細胞代謝等。

 

Absin白細胞介素類重組蛋白產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs00970

Recombinant Mouse IL-2 Protein

5ug

abs00971

Recombinant Mouse IL-3 Protein

10ug

abs00975

Recombinant Mouse IL-7 Protein

10ug

abs00985

Recombinant Mouse IL-33 Protein

10ug

abs04100

Recombinant Mouse IL‐2 Protein

10ug

abs04697

Recombinant Mouse IL-4 Protein

10ug

abs04044

Recombinant Human IL-6 Protein

10ug

abs04045

Recombinant Human IL-2 Protein

10ug

abs04046

Recombinant Human IL-15 Protein

10ug

abs04047

Recombinant Human IL-17A Protein

10ug

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2、干擾素(interferon, IFN)

干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(主要是糖蛋白),是一種由單核細胞和淋巴細胞產生的細胞因子。它們在同種細胞上具有廣譜的抗病毒、影響細胞生長,以及分化、調節免疫功能等多種生物活性。

 

Absin干擾素類重組蛋白產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs00809

Recombinant Human IL-7 Protein

10ug

abs00918

Recombinant Human IL-29 Protein

5ug

abs05109

Recombinant Human IFN-γ Protein(C-10His)

50ug

abs04123

Recombinant Human IFN-γ Protein(E.coli)

10ug

abs01021

Recombinant Mouse IFN-γ Protein

100ug

abs04127

Recombinant Mouse IFNγ Protein(E.coli)

10ug

abs04129

Recombinant Mouse Interferon α-2 Protein

10ug

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3、集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF)

一組在體內外均可選擇性刺激造血祖細胞增殖、分化并形成某一譜系細胞集落的細胞因子,包括巨噬細胞CSF、粒細胞CSF、巨噬細胞/粒細胞CSF、干細胞因子等。

 

Absin集落刺激因子類重組蛋白產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs04383

Recombinant Mouse CSF1 Protein

10ug

abs00994

Recombinant Mouse GM-CSF Protein

5ug

abs00839

Recombinant Human GM-CSF Protein

100ug

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4、生長因子(growth factor, GF)

一類可介導不同類型細胞生長和分化的細胞因子,根據其功能和所作用細胞的不同,分別命名為轉化生長因子(TGF)、神經生長因子(NGF)、表皮生長因子(EGF)、血管內皮細胞生長因子(VEGF)、成纖維細胞生長因子(FGF)等。

 

Absin生長因子類重組蛋白產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs04176

Recombinant Human Epidermal Growth Factor Protein

10ug

abs04204

Recombinant Human TGFB1 Protein

10ug

abs05144

Recombinant Human FGF-basic (154aa) Protein

10ug

abs05161

Recombinant Human VEGF165 Protein

10ug

abs01006

Recombinant Mouse bFGF Protein

10ug

abs04222

Recombinant Mouse TGF-β1 Protein

10ug

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5、趨化性細胞因子(chemokine)

一類對不同靶細胞具有趨化效應的細胞因子家族,可由白細胞和某些組織細胞分泌,是一個包括60多個成員的蛋白質家族。大部分成員含4個保守的半胱氨酸(cysteine, C)根據其N端半胱氨酸的排列方式,可分為CXC、CC、C、CX3C四個亞族。

 

Absin趨化性細胞因子類重組蛋白產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs00810

Recombinant Human IL-8,72a.a.

5ug

abs04159

Recombinant Mouse CXCL12 Protein

10ug

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6、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF)

由于在體內外均可直接殺傷腫瘤細胞而得名。主要成員包括:

1)TNF-α,一種單核因子主要由單核細胞和巨噬細胞產生;

2)TNF-β,一種淋巴因子,主要由淋巴細胞、NK細胞等產生,其生物學活性與TNF-α相類似。

 

Absin腫瘤壞死因子類重組蛋白產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs04294

Recombinant Mouse TNFSF11 Protein

10ug

abs05092

Recombinant Human TNF-α Protein

50ug

abs05160

Recombinant Human TNF-α Protein

100ug

abs04232

Recombinant Human TNF-α Protein

10ug

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7、CD抗原類

白細胞表面的抗原被稱為CD抗原(亦稱白細胞分化抗原),其對生物體的免疫反應起著重要的作用。隨著淋巴細胞成熟,他們在細胞表面表達不同的蛋白質受體,它可以幫助確定被檢查細胞的類型和成熟階段。

 

Absin CD抗原類重組蛋白產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs04571

Recombinant Mouse CD275 Protein(C-6His)

10ug

abs04611

Recombinant Human CD58 Protein(C-Fc)

10ug

abs04618

Recombinant Cynomolgus CD274 Protein(C-6His)

10ug

abs04721

Recombinant Human PD-1 Fc Chimera Protein(C-Fc)

25ug

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8、病毒抗原/蛋白

一個完整的病毒粒子由其遺傳物質(DNA或RNA)和蛋白外殼構成。構成成熟的病毒粒子的蛋白,即病毒結構蛋白,可能包括核衣殼核心蛋白(gag蛋白)、病毒顆粒內包裝的酶(pol蛋白)和膜組分 (env蛋白)。另外,病毒蛋白組還包括了非結構蛋白、調節蛋白和輔助蛋白。這些蛋白在感染細胞時病毒復制以及病毒復制和組裝調節中發揮了重要作用。愛必信提供多種重組病毒蛋白,助力病毒研究。

 

Absin病毒抗原/蛋白產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs01313

Recombinant HBV Surface Antigen(adr) Protein

100ug

abs03000

滅活Sabin株脊髓灰質炎病毒1型抗原

25uL

abs03057

重組乙肝病毒表面抗原HBsAg抗原

500ul

abs04732

Recombinant SARS-CoV-2 Spike S1 Protein(C-His)

100ug

 






9、酶和調節子

酶類是在生物系統內發現的生物催化劑,能催化特定的生化過程。大多數酶是具有催化活性的蛋白質,部分RNA分子(核酶)也具有催化活性。發生在所有生物機體內的生物過程都是化學反應,且大多數是由酶調節的。許多遺傳性的人類疾病,如白化病和苯bing酮尿癥,都是由缺乏特殊的酶引起的。多毒素或活性藥物通過抑制特定的酶促反應發揮作用。

 

Absin酶和調節子產品清單

貨號

產品名稱

規格

abs04301

Recombinant Human PTH Protein(1-84)

10ug

abs04756

Recombinant Human ACE2 Protein(C-His-Avi)

100ug

abs06069

Recombinant Schistosoma Japonicum GST Protein(C-10His)

50ug

 





10、免疫檢查點蛋白

免疫檢查點(ICP)分子指的是對免疫應答發揮抑制或刺激作用的配體-受體對。免疫檢查點在維持免疫穩態和預防自身免疫中起著重要的免疫調節作用。大多數被報道的免疫檢查點蛋白表達于適應性免疫系統的細胞,特別是T細胞和先天免疫系統。

 

Absin 免疫檢查點蛋白產品清單


貨號

產品名稱

規格

abs01295

Recombinant Human Galectin-3 Protein

10ug

abs04602

Recombinant Human Galectin 9 Protein(C-6His)

50ug

abs05507

Recombinant Biotinylated Human CTLA4 Protein(Avi Tag,His Tag)

100ug




 

Absin還專業提供多種重組蛋白如細胞間基質蛋白、修飾酶、血管生成素、熒光蛋白、載脂蛋白、脂肪因子、轉錄因子、CAR-T 相關蛋白、IVD抗原蛋白、免疫球蛋白------- 點擊鏈接查看更多重組蛋白產品

 

Recombinant Human IL-15 Protein(abs05147)

 

白細胞介素-15(IL-15)是1994年發現的一種支持細胞毒性免疫細胞穩態的細胞因子,具有廣泛的生物活性。IL-15能刺激活化的T細胞增殖,促進細胞毒性T淋巴細胞(如CD8+)的誘導,促進NK細胞的產生、增殖和活化。因此,IL-15與其他藥物如檢查點抑制劑、單克隆抗體、化療、放療、CAR-T細胞等聯合應用于迅速擴大的癌癥免疫治療領域,以靶向多種機制,增強對腫瘤的免疫應答,為控制和治療癌癥提供優勢。

 

產品特征:


種屬

來源

E.coli

分子量

12kDa(Reducing)

外觀

凍干粉

序列

Asn49-Ser162

NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGD
ASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS

純度

>95% SDS-PAGE

內毒素水平

<1EU/μg(LAL)

活性

EC50<1ng/mL




 

實驗結果

 

劑量依賴性刺激CTLL-2增殖的EC50<1ng/mL


Absin產品線:

爆款產品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細胞培養(類器官試劑盒+基質膠,胎牛血清+培養添加劑+細胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...

特色產品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...


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