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細胞房除菌方案

閱讀:776      發(fā)布時間:2023-10-31
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微生物污染是一直是細胞培養(yǎng)的一個主要問題,大到諸如細胞間、層流室這種實驗室的設(shè)計布局,小到每一次試劑外包裝的消毒,都是在為了細胞免受外源微生物的侵害。應(yīng)各位老師們的要求,今天這篇文章主要講解細胞房的除菌方案,順便討論一下常見的無菌操作漏洞。

 

當(dāng)您和同門的細胞頻繁出現(xiàn)污染,更換試劑之后仍然不能改善,細胞丟棄一波又一波,建議為細胞間來場消毒吧。無論是紫外線照射(物理方法)還是甲醛加高錳酸鉀熏蒸,都是為了盡可能的殺滅空氣中的微生物。


圖1 細胞室

 

一、紫外線照射法

 

紫外線按照波長劃分為四個波段:長波UVA、中波UVB、短波UVC、真空波UVD。波長越長,穿透能力越強,其中UVC(波長200~280nm)被用來做紫外線殺菌燈,可作用于DNA使一條DNA鏈上相鄰的兩個胸腺嘧啶共價結(jié)合而形成雙聚體改變了DNA的分子結(jié)構(gòu),干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄導(dǎo)致細菌死亡或變異,缺點也是顯而易見的,UVC穿透力差,無法穿透大部分的透明玻璃及塑料同時短時間照射即可灼傷皮膚,長期或高強度照射還會造成皮膚癌



圖2

 

這里提示在購買紫外線消毒燈的時候登錄全國消毒產(chǎn)品網(wǎng)上備案信息服務(wù)平臺查詢備案,可以看到生產(chǎn)許可證,檢測報告等信息。

 

具體可參照:約13m2的房間30w紫外燈(距地面約2.5m)照射1h,照射前抹凈燈管灰塵,建議一周一次。照射時人員禁止入內(nèi)。



圖3 消毒產(chǎn)品網(wǎng)上備案信息

 

二、甲醛加高錳酸鉀熏蒸法

 

甲醛無易燃易爆危險易于獲得故在消毒與滅菌方面使用較為普遍。醛類主要通過凝固蛋白質(zhì)還原氨基酸使蛋白質(zhì)分子烷基化而殺滅細菌和其他微生物,KMnO4是一個強氧化劑,它會使得菌體酶蛋白失去活性,代謝機能障礙而死亡。這種方法的缺點是醛蒸氣刺激性較大對人體有害,是致癌物質(zhì),并且對呼吸道的刺激較大。具體可參照:每立方米加甲醛80ml:高錳酸鉀40g(2:1的比例),一定要先將高錳酸鉀倒入敞口容器,再加入40%的甲醛!密閉熏蒸24h左右,充分通風(fēng)(至少24h)在確保細胞房內(nèi)沒有甲醛的刺激性氣味后實驗人員才能進入。

 

安全提示:動作要迅速,兩者反應(yīng)較強烈,做好防護,注意不要濺到!甲醛遇到KMnO4會產(chǎn)生強烈的氧化反應(yīng),濺出來是很危險的所以一定要使用敞口容器!!!

 

兩者相比,甲醛熏蒸法效果更好,特別對于一些較難消除的真菌,但是由于甲醛的致癌性,不建議頻繁使用,可以結(jié)合紫外線照射法交替進行。

 

三、細胞房除菌劑

 

在進行紫外線照射或者甲醛熏蒸之前,需要對細胞間各個角落進行擦拭,愛必信細胞房清除劑,用于細菌、真菌清除,具有很強的抑菌功能,可用于細胞房的污染控制,通過清除細胞房內(nèi)細菌、真菌及其孢子,可有效防止細胞的污染。



圖4 細胞房除菌劑

 

使用方法:

 

1)直接對細胞房的死角、墻面、空間進行噴灑,也可倒出少許,將脫脂棉球浸泡后擦拭使用。 建議一周處理一次,配合紫外線使用效果更佳。
2)建議每立方米(m^3)使用量為5~8mL,如10m^2、高3m的房間推薦用量為150mL。遇污染爆發(fā)時期,如梅雨季節(jié)等,可適當(dāng)增加用量。若室內(nèi)墻壁上有霉菌生長,可噴灑于墻壁表面,或者用浸泡后的棉球擦拭。

 

溫馨提示:


1)操作時,穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o服和手套操作;
2)處理后,人盡量遠離細胞培養(yǎng)室,待密封20~30 min 通風(fēng) 10min 后再使用;
3)避免直接接觸皮膚、眼睛,一旦接觸,應(yīng)立即用大量的清水沖洗,不要延誤。



圖5 實驗室清潔劑


參考文獻


[1] 劉水平,羅志勇.細胞培養(yǎng)室空氣消毒效果的檢測[J].生物醫(yī)學(xué)工程研究,2006(01):53-54.

 

今天的講解就到這里啦,感興趣的老師們可以公眾號“愛必信生物"后臺留言哦。

 

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貨號

產(chǎn)品名稱

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100mL

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100mL

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黑膠蟲清除劑

200uL

abs9371

水浴鍋抑菌劑

100mL

abs9372

培養(yǎng)箱除菌劑

480mL

abs9376

支原體預(yù)防劑

500uL

abs9245

青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100×,三抗)

100mL

abs9253

支原體清除試劑

20mg

abs9373

細胞房除菌劑

480mL





 

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Absin特色產(chǎn)品線:

WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...

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