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2024年1月，《Scientific Reports》上發表論文：

“Hesperetin promotes bladder cancer cells death via the PI3K/AKT pathway by network pharmacology and molecular docking"

“橙皮苷通過網絡藥理學和分子對接，通過PI3K/AKT通路促進膀胱癌細胞死亡"

摘要：

膀胱癌(BLCA)患者在手術和化療后仍有高復發率。橙皮苷(Hesperetin, HE)作為一種天然化合物，因其毒性低、易于獲取而備受關注。然而，HE對BLCA的抑制作用尚不清楚。利用網絡藥理學方法預測HE調控的中樞基因和富集途徑在BLCA治療中的作用。可視化了HE蛋白與樞紐蛋白的分子對接。用菌落和CCK8檢測細胞增殖，用transwell和傷口愈合檢測證實BLCA遷移。此外，通過Hoechst染色、透射電鏡(TEM)和活性氧(ROS)測定證實了細胞凋亡和鐵下垂的發生。Western Blotting驗證中心蛋白、靶功能和通路。SRC, PIK3R1和MAPK1被確定為BLCA中HE的樞紐靶點，涉及PI3k/AKT通路。此外，HE抑制BLCA細胞的增殖和遷移。HE顯著抑制MMP2/MMP9蛋白表達。Bax和cleaved caspase-3的表達增加表明HE可促進BLCA細胞凋亡。此外，Hoechst染色顯示凋亡核的集中和照亮。ROS的激活和GPX4表達的下降提示HE可能通過抗blca過程誘導鐵下垂。HE處理的BLCA細胞線粒體縮小，凋亡小體出現，線粒體嵴減少或缺失。科研人員提出HE可以抑制BLCA細胞的增殖和遷移，促進細胞凋亡和鐵下垂。HE可能通過靶向SRC、PIK3R1和MAPK1等蛋白以及PI3K/AKT通路發揮作用。

在該研究中，對T24(HTB-4) 和5637(HTB-9) 人膀胱癌細胞的體外培養 ，均用到了Ausbian進口胎牛血清。