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過量的間質和癌癥相關成纖維細胞(CAF)促進癌癥進展并促進免疫逃避。對基質操縱免疫微環(huán)境的機制的深入了解有助于改善癌癥的治療。

發(fā)表在《Cancer Research》上，標題為“Stromal Reprogramming through Dual PDGFRα/β Blockade Boosts the Efficacy of Anti-PD-1 Immunotherapy in Fibrotic Tumors"的研究，闡明基質重編程和改進癌癥免疫治療的潛在途徑。血小板衍生生長因子C (PDGFC)和D的表達與胃癌患者的不良預后顯著相關，PDGF受體β (PDGFRβ)在彌漫性胃癌間質中主要表達。經PDGFs刺激的CAFs顯示CXCL1、CXCL3、CXCL5和CXCL8的表達顯著增加，這些細胞參與多形核髓源性抑制細胞(PMN-MDSC)的募集。纖維化胃癌異種移植腫瘤表現(xiàn)為PMN-MDSC積累增加，淋巴細胞浸潤減少，抗pd -1耐藥。單細胞RNA測序和空間轉錄組學顯示PDGFRα/β阻斷通過基質修飾逆轉免疫抑制微環(huán)境。最后，PDGFRα/β阻斷聯(lián)合抗pd -1治療可協(xié)同抑制纖維化腫瘤的生長。這些發(fā)現(xiàn)強調了間質重編程對免疫再激活的影響，以及纖維化癌患者聯(lián)合免疫治療的潛力。

為了建立連續(xù)移植小鼠模型，科研人員將GAN-KP細胞皮下植入小鼠側腹。腫瘤細胞接種3周后處死小鼠。將含有各種非癌成分(如成纖維細胞)的腫瘤塊在1x TDR (BD Biosciences)中切碎并解離，在37°C下連續(xù)旋轉30分鐘。將樣品懸浮于含有2% FBS和2 mmol/L EDTA的PBS緩沖液中，將細胞懸浮液應用于70 μm濾網。每個樣品中含有的紅細胞通過加入1ml VersaLyse (Beckman Coulter)溶解10分鐘，然后在緩沖液中冷卻。將微球鍍在膠原包被培養(yǎng)皿(IWAKI)上，用含有10% FBS和Zell Shield (Minerva Biolabs)的RPMI1640培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)1周后皮下植入小鼠側腹。腫瘤細胞接種3周后處死小鼠。該過程作為連續(xù)移植方法重復進行。

Zell Shield可以預防細胞實驗室的細胞支原體污染，方便高效。