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CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T |
貨號 | YSP7068 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 公司產品僅用于科研 |
實驗步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環,通過多次循環反應,使目的DNA得以迅速擴增。其要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
【產品名稱】雜色青霉探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Penicillium versicolor
【產品編號】YSP7068
【包裝規格】50T
【預期用途】
產品僅用于科研本產品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測,所用儀器為實時熒光PCR儀,可通過實時擴增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗原理】
本試劑盒采用實時熒光PCR技術,針對鴨源性成分核酸序列設計特異性引物和熒光探針,通過實時熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對鴨源性成分核酸進行定性檢測。
*的擴增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優化的反應體系保證更高的擴增效率。以相同量的293T細胞cDNA為模板,擴增β-actin基因,與同類產品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴增信號更強,擴增效率更高。?
PCR實驗方法步驟:
雜色青霉探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
產品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
98%25g25g6基7異戊基香豆素94804Metallothionein
慶大霉素(標準品) 質量規格:含量測定 Gentamicin sulfate V-P半固體瓊脂/Voges-Proskauer Semisolid Agar細菌V-P試驗250克國產/進口
白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白 (aa 30-390, His & GST 標簽)*250(g)
人性成纖維細胞生長子(FGF1)BarX1 BarX1蛋白抗體規格:96T/48TAspartame規格:200mgRho關聯含卷曲螺旋蛋白激酶5檢測試盒20mg人胚上皮細胞,293A細胞1x10^6cells
98%1g1g3'O去基牛蒡子苷元staphylococcus aureus ent
馬來氨地平 質量規格:>98%,BR Amlodipine maleate 苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti甜菜莖點霉
白介素2(IL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 ATP1B1 蛋白 (His 標簽)*250(g)
人FASLGOLPH2/GP73 高爾基體膜蛋白GP73抗體規格:96T/48T規格:500mgRNA結合基序蛋白6檢測試盒20mg人胚細胞,293FT細胞1x10^6cells
98%5g5g胃蛋白酶(豬胃粘膜)vacuolar H+ATPase
吡嘧磺隆(分析標準品,99%) 質量規格:分析標準品,99% Pyrazosulfuron
Peptone Water Medium用于靛基質試驗β半乳糖苷酶檢測試盒20mg過氧化氫酶檢測試盒peroxiredoxin2
99%25g1g胃蛋白酶(豬胃粘膜)HMGCoA
多聚賴氨 質量規格:BR Poly-L-lysine A-427(人肺細胞)5×106cells/瓶×2
Alkaline Peptone Water副溶血性弧菌的選擇性增菌培養景天庚糖1,7二酶檢測試盒20mg過氧化物還原酶2檢測試盒reducedglutathione
99%100g5g胃蛋白酶(豬胃粘膜)Hepatitis A virus IgG antibody
木蝴蝶苷B 訂購|咨詢 規格: 20mg 9號染色體開放閱讀框30抗體 SRP ELISA Kit 人抗信號識別顆粒抗體(SRP)ELISA試劑盒
Strain Store Medium常用細菌斜面傳代血吸蟲IgG抗體檢測試盒20mg還原型谷胱甘肽檢測試盒NuclearfactorkappaB
雜色青霉探針法熒光定量PCR試劑盒11O羅漢果苷V CAS號: 126105111 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
二咖酰菊苣 CAS號: 70831560 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
3,4,5三咖酰奎寧 CAS號: 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
5,7二羥色原 CAS號: 31721945 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
伽升沃 D CAS號: 107390089 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
伽升沃 C CAS號: 76996275 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鉤吻素;鉤吻堿 CAS號: 509159 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鉤吻素子 CAS號: 1358765 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
葫蘆素E CAS號: 18444661 規格: HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢
通關藤苷H CAS號: 191729449 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
野漆樹苷 CAS號: 17306466 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
百兩金素A CAS號: 23643610 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
氧代川南亭堿 CAS號: 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
苔黑葡萄糖苷;地衣二葡萄糖苷 CAS號: 21082337 規格: HPLC≥97%;20mg 訂購|咨詢
7O葡萄糖苷 CAS號: 16290076 規格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
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