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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50ul 100ul 200ul |
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應用領域 | 化工,生物產業 | 主要用途 | 產品僅供科研 |
英文名稱 | CYB5D1 | 抗體來源 | Rabbit |
抗體類型 | Polyclonal | 交叉反應 | Human,Mouse,Rat,Dog,Cow,Horse,Sheep |
亞型 | IgG | 保存條件 | Shippedat4℃.Storeat-20°C |
免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
商品屬性:
產品名稱 | 規格 | 產品分類 | 抗體來源 |
細胞色素B5結構域蛋白1抗體 | 50ul、100ul、200ul | 抗體 / 一抗 | Rabbit |
規格 50ul 100ul 200ul
產品分類 抗體 / 一抗
英文名稱 :CYB5D1
英文別名 :CYB5D 1; Cytochrome b5 domain containing 1; Cytochrome b5 domain containing protein 1; FLJ32499; Gm740; MGC118302; RP23 5O23.2; CB5D1_HUMAN.
交叉反應 :Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
標記 :Unconjugated
抗體來源:Rabbit
抗體類型:Polyclonal
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human CYB5D1
蛋白細胞定位:細胞核,細胞漿
純化方法:affinity purified by Protein A
亞型:IgG
性狀:Liquid
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 :
Cytochrome b5 is a membrane-bound heme protein that possesses two heme groups and functions as an electron carrier for many membrane-bound oxyases. Two isoforms of cytochrome b5, a microsomal membrane-bound form and a cytoplasmic form, are produced by alternative splicing. Mutations in the e encoding cytochrome b5 are associated with Leber’s hereditary optic neuropathy and myopathy. CYB5D1 (cytochrome b5 domain containing 1) is a 228 amino acid protein that ts as two alternatively spliced variants and contains one cytochrome b5 heme-binding domain, suggesting a similar function to cytochrome b5. The e encoding CYB5D1 maps to human chromosome 17, which comprises over 2.5% of the human ome and encodes over 1,200 es. |
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
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抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
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