蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Lysophospholipase I (LYPLA1)

APT1; LPL1; LYSOPLA; Acyl-Protein Thioesterase 1

型號：GOY-01D2326

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：28.4kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Asp230 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

芳基酯酶A(ARSA)重組蛋白英文名稱：Recombinant Arylsulfatase A (ARSA)MLD; ASA; Metachromatic Leucodystrophy; Cerebroside-sulfatase物種：Human，人

永離有絲分裂基因A相關(guān)激酶2(NEK2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Never In Mitosis Gene A Related Kinase 2 (NEK2)HsPK 21; HsPK21; NEK2A; NLK1; NimA-like protein kinase 1; Serine/threonine-protein kinase Nek2物種：Mouse，小鼠

細(xì)胞色素P450 17A1(CYP17A1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cytochrome P450 17A1 (CYP17A1)S17aH; CPT7; P450C17; 17-Alpha-Hydroxylase; 17-alpha-hydroxyprogesterone aldolase/17,20-Lyase; Steroid 17-alpha-monooxygenase; Cytochrome P450,Family 17,Subfamily A,Polypeptide 1物種：Mouse，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeMLA144臂猿淋巴瘤細(xì)胞

豆腐果苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Helicid

 香菇 Lentinula edodes地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

豆甾（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：95%,標(biāo)準(zhǔn)品,大豆來源 Stigmasterol

 CNE1, 人鼻咽細(xì)胞系人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞

豆甾 質(zhì)量規(guī)格：>90%,GC Stigmasterol

 人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基石刁柏(蘆筍)擬莖點(diǎn)霉 Phomopsis asparagi

豆甾 質(zhì)量規(guī)格：>90 %,GC Stigmasterol

 異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala普雷恩毛霉 Mucor prainii

硝呋腙鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Nitrovin HCL,Difurazone

 桿菌屬 Lactobacillus sp.膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum

杜鵑素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Farrerol

 根瘤菌Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)

對香豆;對羥基肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 p-Coumaric acid

 USMC(大鼠血管平滑肌細(xì)胞)大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

對葉百部堿（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Tuberstemonine

溶血磷脂酶Ⅰ(LYPLA1)重組蛋白小鼠100mL PIPES Buffer，0.5M, pH8.0  PIPES Buffer，0.5M, pH8.0  常溫保存

白E(IgE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1瓶 293A細(xì)胞株 293A 低溫運(yùn)輸和保存

人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

25uL Fluorescein -12- dUTP溶液 (1mM) Fluorescein -12- dUTP Solution -20℃避光保存

50T 口蹄疫病毒O亞型PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人CD8分子(CD8)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

人促胰液素/胰泌素(Secretin)免疫試劑盒

1mL 小牛胸腺DNA溶液（10mg/mL） Calf Thymus DNA Solution -20℃保存

100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.5   MOPS Buffer,0.5M,pH6.5   常溫保存

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH4.0   Citrate Buffer,0.5M,pH4.0   常溫保存