蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)

CMM3; PSK-J3; Cell division protein kinase 4

型號：GOY-01D432

酶與激酶

腫瘤免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：33.5kDa

實(shí)際分子量：33kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Tyr6~Leu295 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Glucosidase Alpha, Neutral AB (GaNAB)  產(chǎn)品名稱：中性葡糖苷酶αAB(GaNAB)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glycogen Debranching Enzyme (AGL)  產(chǎn)品名稱：糖原脫支酶(AGL)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 2, Branched (ACOX2)  產(chǎn)品名稱：酰基氧化酶2(ACOX2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 2, Branched (ACOX2)  產(chǎn)品名稱：酰基氧化酶2(ACOX2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 3, Pristanoyl (ACOX3)  產(chǎn)品名稱：酰基氧化酶3(ACOX3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Coenzyme A Synthase (COASY)  產(chǎn)品名稱：合酶(COASY)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CD39樣蛋白1抗體 ENTPD2

磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體 phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220)

真核翻譯起始因子5抗體 EIF5

早期B淋巴細(xì)胞因子2抗體 EBF2

ELAVL2蛋白抗體 ELAVL2

ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體 ELAVL2 + ELAVL4

同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體 Engrailed 1

轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體 ER81

真核翻譯起始因子3K抗體 eIF3K

早期生長反應(yīng)蛋白3抗體 EGR3

受體KA1抗體 EAA1

EMSY蛋白抗體 EMSY

周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白人大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱：NG108-15

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白 英文名稱：Native Transferrin Receptor (TFR)

人正常胎肝細(xì)胞英文名稱：L-O2

胰月示-亞鹽-環(huán)基礎(chǔ)(TSC) 規(guī)格： 100g 用途： 用于食品和臨床樣本中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(SN0177-92，ISO標(biāo)準(zhǔn))。

人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱：GIST

硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TrxR1)

BT-474(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

BL培養(yǎng)基/BL Medium雙岐桿菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

再生蛋白1(NEO1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Neogenin 1 (NEO1)

NTM培養(yǎng)基/NTM Medium淋球菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

胃泌素(GT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Gastrin (GT)