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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D319 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 10 ( |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產品屬性:
產品名稱 | 物種 | 貨號 |
解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D319 |
英文名稱:Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10)
CD156-C; CD156c; MADM; Kuz; CDw156; Kuzbanian protein homolog; Mammalian disintegrin-metalloprotease
型號:GOY-01D319
酶與激酶
腫瘤免疫
感染免疫
心腦血管
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞膜, 細胞質, 高爾基體
預測分子量:25.4kDa
實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Arg420~Val641 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:6.5
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
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操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養細胞蛋白提取
1. 貼壁培養的細胞,吸去培養基后,加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次,每次振搖數次以盡量去除培養液;
2. 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產品:
6號染色體開放閱讀框62抗體 C6orf62
6號染色體開放閱讀框58抗體 C6orf58
6號染色體開放閱讀框70抗體 C6orf70
6號染色體開放閱讀框72抗體 C6orf72
7號染色體開放閱讀框13抗體 C7orf13
7號染色體開放閱讀框29抗體 C7ORF29
8號染色體開放閱讀框72抗體 C8orf72
7號染色體開放閱讀框30抗體 C7orf30
7號染色體開放閱讀框36抗體 C7orf36
7號染色體開放閱讀框42抗體 C7orf42
7號染色體開放閱讀框57抗體 C7orf57
7號染色體開放閱讀框43抗體 C7ORF43
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