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蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白大鼠

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-02 15:17:08瀏覽次數(shù):267次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D149 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白大鼠公司正在出售的產(chǎn)品:人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人歸巢相關(guān)細(xì)胞黏附分子/CD44分子(HCAM/CD44)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人可溶性CD28(sCD28)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Ubiquitin Specific Peptidase 8 (USP8)  產(chǎn)品名稱:泛素特異性肽酶8(USP8)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD17b3)  產(chǎn)品名稱:17-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD17b3)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 14 (HSD17b14)  產(chǎn)品名稱:17-β-羥基類固醇脫氫酶14(HSD17b14)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Fucosyltransferase 6 (FUT6)  產(chǎn)品名稱:巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶6(FUT6)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Adenylate Kinase 3 (AK3)  產(chǎn)品名稱:腺苷酸激酶3(AK3)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Aminolevulinate Delta Synthase 1 (ALAS1)  產(chǎn)品名稱:氨乙酰丙酸δ合酶1(ALAS1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白大鼠

Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

GOY-01D149

 

 

產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白大鼠

英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

PRKCH; PRKC-H; PKC-L; PRKCL; NPKC-Eta

型號(hào):GOY-01D149

酶與激酶

物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測(cè)分子量:-

實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):-

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體 CCDC28A

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體 CCDC25

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體 CCDC28B

腫瘤/睪抗原74抗體 CT74

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體 CCDC38

7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框72抗體 C7orf72

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體 CCDC42

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 CCDC47

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體 CCDC46

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體 CCDC63

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體 CCDC43

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體 CCDC54

蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白大鼠膠韌革菌宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

苜蓿中華根瘤菌凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans

膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus香菇 Lentinula edodes

HHCC(人肝細(xì)胞)MA-782(小鼠腺細(xì)胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

白靈側(cè)耳 Pleurotus nebrodensis

巴固氮螺菌 Azospirillum brasilense

大豆慢生根瘤菌植物桿菌 Lactobacillus plantarum

玫瑰小雙孢菌 Microbispora rosea金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae

大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)基人支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

EC109,人食管細(xì)胞 Human

洛格酵母 Saccharomyces logos

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

 


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