蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：基質金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)

SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1

型號：GOY-01D68

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌, 細胞外基質

預測分子量：21.2kDa

實際分子量：20kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Asn278~Gly450 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：6.3

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 26 (CD26)  產品名稱：CD26分子(CD26)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

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英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 26 (CD26)  產品名稱：CD26分子(CD26)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

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英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)  產品名稱：丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)  產品名稱：花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

磷酸化自噬相關蛋白4C抗體 phospho-ATG4C(Ser166)

磷酸化自噬相關蛋白4A抗體 phospho-ATG4A(Ser100)

磷酸化自噬相關蛋白16A抗體 phospho-ATG16A(Ser213)

磷酸化蛋白激酶AKT3抗體 phospho-AKT3 (Ser472)

磷酸化能受體β2抗體 phospho-ADRB2 (Ser261)

磷酸化水通道蛋白2抗體 phospho-AQP2(Ser261)

磷酸化自噬相關蛋白3抗體 phospho-ATG3 (Tyr18)

醛縮酶2抗體 ALDOB

錨蛋白重復結構域蛋白11抗體 ANKRD11

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磷酸化活化復制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr53)

基質金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白大鼠CAL-27(人舌鱗細胞)雜色曲霉 Aspergillus versicolor

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

酸桿菌屬 Lactobacillus sp.貝葉多孔菌

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii苜蓿中華根瘤菌

普雷恩毛霉 Mucor prainii人肺大靜脈平滑肌細胞培養基

香菇 Lentinula edodes人食管平滑肌細胞培養基

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens片球菌 Pediococcus sp.

人支氣管上皮細胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

黑木耳 Auricularia auricula葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

大鼠結腸平滑肌細胞培養基大豆慢生根瘤菌

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

NIH 3T3/小鼠成纖維細胞Caki-2(人腎透細胞細胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus