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Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)

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具體成交價以合同協議為準

產品型號1mg

品       牌R&D/美國

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-22 11:09:52瀏覽次數:454次

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供貨周期 現貨 貨號 GOY-F10179
應用領域 化工 主要用途 僅供科研使用
Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)公司正*的各種產品細胞半胱-9(CASPASE-9)活性熒光定量檢測試劑盒
組織半胱-9(CASPASE-9)活性熒光定量檢測試劑盒
細胞半胱-10(CASPASE-10)活性比色法定量檢測試劑盒
組織半胱-10(CASPASE-10)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞半胱-10(CASPASE-10)活性熒光定量檢測試劑盒

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研

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Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)

Fluo-2, AM

1mg

GOY-F10179

產品詳細介紹:

Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士發明的鈣離子指示劑Fluo 系列之一,目前,Fluo-3 Fluo-4 已成熟商品化。然而,Fluo-2 在細胞內比Fluo-4 要更明亮,主要可能是由于大部分細胞對FLuo-2 的加載能力要高于FLuo-4

Fluo-3 成像涉及到鈣離子信號通路的多個方面,Fluo-3 經常應用在流式細胞術上,如螯合劑光活化、第二信使、神經遞質以及細胞水平的藥理篩選。Fluo-3 在這些應用里之所以能大量運用主要是由于其幾個重要特性:Fluo-3 可以被氬離子激光器488nm 激發,并在與Ca2+結合后,發射熒光很明亮的熒光信號。Fluo-4 Fluo-3 以兩個氟原子取代氯原子的類似物,這一微小的結構變化使得Fluo-4探針在488nm 激發光下的熒光信號得到增強,信號穩定持續,可以應用于共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、微孔板讀數儀。

Fluo-2Fluo-3 Fluo-4 在與Ca2+結合后熒光增強,與紫外激發的探針fura-2 indo-1 不同,不會發生光譜漂移。熒光光密度在與Ca2+結合后,增強至少100 倍。

儲存:-20℃,避光,有效期12個月。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅
b.
單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNADNA污染。
c
.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
兔干擾素-β(rabbit IFN-β)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  5-Benzyl D-glutamate  中文名:D-5-苯甲酯  分子式:C12H15NO4  度:98.0%

兔干擾素-r(rabbit IFN-r)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝     5-Benzyl D-glutamate  中文名:D-5-苯甲酯  分子式:C12H15NO4 

兔干擾素-a(rabbit IFN-a)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  5-Benzyl L-glutamate  1676-73-9  中文名:L-5-芐酯  分子式:C12H15NO4 

兔肝細胞生長因子(rabbit HGF)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-74-6  中文名:  分子式:C18H27N3O4 

兔分泌型球蛋白Aelisa試劑盒   兔分泌型球蛋白A試劑盒   規格型號:96T/48T   兔分泌型球蛋白A試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔分泌型球蛋白A試劑盒、兔分泌型球蛋白A elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  中文名:  分子式:C10H16N2O6S3
N-
硝基-L-精甲酯  N'-Nitro-L-arginine-methyl ester   質量規格:>98% Ratphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit大鼠0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)ELISA試劑盒規格:96T/48T

N-苯甲酰-L-酪乙酯(BTEE)  N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  質量規格:>98% GPDGP(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

AEBSF絲抑制劑  AEBSF HCl  質量規格:>98%,BR MouseSubstanceP,SPELISA試劑盒小鼠P物質(SP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

AEBSF(進分)  AEBSF HCl  質量規格:>97%,進分TCI A2215 小鼠顆粒酶A(GZMA)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMA ELISA Kit

鹽酸貝他定(進口)  Bestatin HCl  質量規格:≥98%,美國進口 人芳香烴受體(AhR)ELISA檢測試劑盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 96T/48T

鄰菲啰啉鹽酸鹽,一水  1,10-Phenanthroline  monohydrate  質量規格:>99% 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit

膦酰二肽鈉  Phosphoramidon di salt  質量規格:0.99 英文名稱RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)規格:96T/48T

癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷  Decyl β-D-glucopyranoside   質量規格:>98%,BR 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

德羅特韋(GSK-1349572,DTG)  Dolutegravir,GSK1349572  質量規格:>98%,BR ELISAKitfPSA人游離前列腺特異性抗原規格:48T/96T

十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂酰基喃葡萄糖  Dodecyl glucopyranoside  質量規格:>99%,BR 小鼠抗內膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 ,英文名: EMAb ELISA Kit
Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR
分析-鈣離子指示探針)細胞AMPK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織PKC激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞PKC激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織Src激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞Src激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(
在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)


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