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人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒實驗方法

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產(chǎn)品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-03-09 14:30:50瀏覽次數(shù):225次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物的含量。

人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱:Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱:Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit 
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,再加入顯色劑 B 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

TMEM166  跨膜蛋白166抗體規(guī)格: 0.2ml

EPO  紅細(xì)胞生成素抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-CASC3(Tyr181)  磷酸化瘤易感候選基因3抗體規(guī)格: 0.1ml

UCHL1/PGP9.5  神經(jīng)細(xì)胞胞漿蛋白9.5抗體(蛋白基因產(chǎn)物9.5)規(guī)格: 0.1ml

Bestrophin 4  卵黃狀黃斑病蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-SHC(Tyr349)  磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

NPTX1  神經(jīng)細(xì)胞正五聚體1抗體規(guī)格: 0.1ml

CYP2W1  細(xì)胞色素P450 2W1抗體規(guī)格: 0.2ml

CHKL/Ethanolamine kinase beta  乙醇胺激酶β抗體規(guī)格: 0.2ml

GNLY/NKG5  顆粒溶素抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-EGFR (Tyr1138)  磷酸化表皮生因子受體抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1197)  磷酸化表皮生因子受體抗體規(guī)格: 0.1ml

eIF2 alpha  真核啟動因子2α抗體(eIFα2)規(guī)格: 0.2ml

ADORA2B  A2b受體抗體(神經(jīng)生因子1受體)規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗羊IgM規(guī)格: 0.1ml

NT-3  神經(jīng)營養(yǎng)因子3抗體 0.1ml

CA153/EMA/Mucin-1 subunit alpha  相關(guān)抗原抗體 0.1ml

Drebrin  腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

FBXO31  F-box蛋白家族FBXO31抗體規(guī)格: 0.2ml

CK7(human)  細(xì)胞角蛋白7抗體(人)規(guī)格: 0.2ml

CRLR/CGRPR1  降鈣素基因相關(guān)肽1型受體抗體規(guī)格: 0.1ml

CRF/CRH  促上皮質(zhì)激素釋放因子抗體規(guī)格: 0.1ml

CYP5A1/Thromboxane synthase  栓素合成酶抗體規(guī)格: 0.2ml

Goat anti-human IgM whole serum  羊抗人IgM抗清規(guī)格: 1ml Prostaglandin D2 AChE Tracer 500 dtnProstaglandin D2 AChE Tracer

13S-HpOTrE(γ) 100 ug13S-hydroperoxy-6Z9Z11E-octadecatrienoic acid; 13S-HpOTrE(γ)

Nitrotyrosine AChE Tracer 100 dtnNitrotyrosine AChE Tracer

TBS-Polysorbate Stock Solution 10X, pH 7。4 1 LTBS-Polysorbate Stock Solution 10X pH 74

Eicosapentaenoyl PAF C-16 10 mg1-O-hexadecyl-2-O-5Z,8Z,11Z14Z17Z-eicosapentaenoyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Eicosapentaenoyl PAF C-16

C-8 Ceramine 1 mgN-octylsphingosine; C-8 Ceramine

COX-FIS Arachidonic Acid 1 eaArachidonic Acid; COX-FIS Arachidonic Acid

Formaldehyde Assay Detector 300 mgFormaldehyde Detector Formaldehyde Assay Detector

CAY10397 1 mg5-[[4-ethoxycarbonylphenyl]azo]-2-hydroxy-benzeneacetic acid; CK47A; CAY10397

Ebselen 10 mg2-phenyl-1,2-benzisoselenazol-32H-one Ebselen

Caffeic Acid phenylethyl ester 1 g)(E-3-3,4-dihydroxyphenyl-2-propenoic acid, 2-phenylethyl ester; CAPE|2-Phenylethyl Caffeate|β-Phenylethyl Caffeate; Caffeic Acid phenylethyl ester

人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒實驗方法PPA 5 mg5-phenyl-4E-pentenol PPA

MEG sulfate 50 mg)(2-mercaptoethyl-guanidine sulfate; MEG sulfate

Angelis Salt 5 mgdisodium diazen-1-ium-12,2-triolate Sodium α-oxyhyponitrite; Angelis Salt

Eicosapentaenoic Acid methyl ester 10 mg5Z8Z,11Z,14Z17Z-eicosapentaenoic acid, methyl ester; EPA methyl ester Eicosapentaenoic Acid methyl ester

Linoleoyl Ethanolamide-d4 1 mgN-2-hydroxyethyl-1,1,22-d4-9Z,12Z-octadecadienamide; Linoleoyl Ethanolamide-d4

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