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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
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貨號 | GOY-01X1160 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1160 |
名稱 小鼠腸道干細胞
2.組織來源:腸組織
3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
小鼠腸道干細胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內大的微生態系統。腸道干細胞(ISC)也稱腸道上皮干細胞,主要位于腸黏膜隱窩內,其與腸道黏膜上皮的更新和修復密切相關。正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個遷移過程大約3-5d,在遷移過程中腸道干細胞分化形成不同的腸黏膜細胞。當受到外界生理或病理信號作用時,ISC可持續增殖、分化為成熟腸上皮細胞,如腸型細胞、杯狀細胞、內分泌細胞和潘氏細胞等,從而維持腸道黏膜結構和功能的穩定性。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腸道干細胞采用-膠原酶聯合消化后,用腸道干細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腸道干細胞經MSI-1免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 球形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
親和層析柱1 mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5100mL
親和層析柱3 mL RNase-free SDS 溶液 ,10%100mL
親和層析柱6 mL RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%100mL
親和層析柱12 mL RNase-free PVP K30 溶液 ,20%100mL
親和層析柱30 mL RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0100mL
大鼠脂肪酸合成酶(FAS)elisa檢測試劑盒
大鼠脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)elisa檢測試劑盒
大鼠脂多糖結合蛋白(LBP)elisa檢測試劑盒
大鼠脂多糖/內毒素(LPS)elisa檢測試劑盒
大鼠脂多糖(LPS)elisa檢測試劑盒
小鼠腸道干細胞人胱硫醚β-合酶(CBS)elisa分析檢測試劑盒
人胱天1(Casp-1)elisa分析檢測試劑盒
人胱天10(CASP10)elisa分析檢測試劑盒
人胱天12(Casp-12)elisa分析檢測試劑盒
人胱天3(Casp-3)elisa分析檢測試劑盒
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