我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態、培養條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息，我們專業您的細胞系實驗，讓您實驗再無煩擾！產品僅用于科研

名稱    胃癌組織成纖維細胞
2.組織來源：胃癌組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

人胃癌組織源成纖維細胞分離自患有胃癌病人的胃癌組織；胃癌（gastric carcinoma）是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，在我國各種惡性腫瘤中發病率居，胃癌可發生于胃的任何部位，其中半數以上發生于胃竇部，胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累，絕大多數胃癌屬于腺癌。在胃癌侵襲和轉移的過程中，涉及諸多復雜的過程，如細胞外基質的硬化和降解、新生血管的形成等，而這些過程會直接或間接的引起腫瘤微環境（Tumor mircoenvironment）的改變。腫瘤微環境即腫瘤細胞生存的外部環境，由不同種類的非腫瘤性的細胞與細胞外基質（Extracellular matrix，ECM）構成，包括纖維細胞，免疫細胞，內皮細胞，間充質干細胞等，腫瘤細胞通過調控這些間質細胞，創造出有利于自身侵襲轉移的條件，從而使得腫瘤得到進展。越來越多的證據表明，腫瘤微環境的改變在腫瘤進展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環境中，研究多也是主要的間質細胞是腫瘤相關成纖維細胞（cancer-associated fibroblasts, CAFs）。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細胞和成纖維細胞樣細胞演化而來。胃癌組織源成纖維細胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。剛分離的胃癌組織源成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人胃癌組織成纖維細胞采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的人胃癌組織成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
鼠李糖發酵管5ml 30 支/盒   改良馬丁瓊脂培養基200ml

血鏈球菌   淺灰鏈霉菌杭州變種

蘇云金芽胞桿菌殺蟲亞種 Bacillus thuringiensis subsp. entomocidus   嗜麥芽寡養單胞菌

產紫青霉   小紅酵母

南方樹舌   土星漢遜酵母
檸檬酸CA含量測試盒 50T/48樣 比色法

磷酸果糖激酶PFK測試盒 50T/48樣 紫外比色法

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC測試盒 50T/48樣 紫外比色法

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK試劑盒 50T/48樣 紫外比色法

NADPH-還原酶NCR測試盒 50T/48樣 比色法
胃癌組織成纖維細胞小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa檢測試劑盒

小鼠Ⅳ型膠原(COL4)elisa檢測試劑盒

小鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)elisa檢測試劑盒

小鼠Ⅴ型膠原α2(COL5α2)elisa檢測試劑盒

小鼠Ⅵ型膠原α1(COL6α1)elisa檢測試劑盒
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。