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雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次特點
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次成分使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次成分產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
產品介紹:
規格及成分:
pcDNA3.1(+)/CAT(pcDNA3.1CAT) (60908-1450)
pcDNA6/myc-His A(pcDNA6mycHisA)
pCMV-3Tag-9(pCMV3Tag9)
pCMV6-AC-HA-His(pCMV6ACHAHis)
pcopneo
pDB.GST
pDR540
pECFP-MEM (pECFPMEM)(60908-2551)
pENTR3C(60908-2730)
pET-3d(pET3d,pET-3d(+)(60908-2739)y
pET22b-CPDSacI(pET22bCPDSacI)
pFA6a-13Myc-His3MX6(pFA6a13MycHis3MX6)
pFD666
pGAD53m(60908-3446)
pGEX-5X-2(pGEX5X2)
pGL4.37[luc2P ARE Hygro](60908-4001)
pGWF1
phRG-TK毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
蘇云金芽胞桿菌莫氏變種 Bacillus thuringiensis var. merrisoni
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
托姆青霉 Penicillium thomii
玫瑰小雙孢菌 Microbispora rosea
C127(小鼠腺細胞)5×106cells/瓶×2
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii
SW1116(人結腸腺細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
粗柄羊肚菌 Morchella crassipas
人小氣道平滑肌細胞*培養基100mL
U266B1 [U266], 人多發性骨髓瘤細胞 Human
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
Calu-1(人肺細胞)5×106cells/瓶×2
爪哇根霉 Rhizopus javanicus
尿素八疊球菌 Sarcina ureae
DAB Kit/DAB顯色試劑盒20m、60ml國產
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.
pIEx-10(pIEx10)
pIZ/V5-HIS(pIZV5HIS)(60908-4341)
pJSC73
pL1
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